C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/575 (2006.01) C07K 14/72 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2270431
A method for the detection of a compound that mimics, potentiates or inhibits the physiological effect of the ob-protein, which method comprises: (a) for a compound which mimics the physiological effect of the ob-protein, assessing the effect of the compound upon an ob-protein activated signal transducer and activator of transcription (STAT) DNA response element coupled to a reporter gene; or (b) for a compound which potentiates or inhibits the physiological effect of the ob-protein, assessing the effect of the compound upon the response provided by ob-protein upon an ob-protein activated STAT DNA response element coupled to a reporter gene; wherein, the response element and the reporter being expressed in an ob-protein responsive cell line, which cell line is selected from the list consisting of: a hypothalamic derived cell line; a pheochromocytoma derived cell line; a haematopoietic derived cell line; a pancreatic derived cell line; a liver derived cell line; a preadipocyte derived cell line; a skeletal muscle derived cell line; and an ovarian derived cell line; or the response element and the reporter are expressed in a cell line, which cell line (the engineered cell line) is also transfected with a polypeptide which is capable of mediating the stimulation by ob-protein of an ob-protein activated STAT DNA response element and contains the appropriate STAT proteins.
La présente invention a trait à un procédé de détection d'un composé qui imite, potentialise ou inhibe l'effet physiologique de la protéine ob, ce procédé consistant: (a) pour un composé qui imite l'effet physiologique de la protéine ob, à évaluer l'effet du composé sur un transducteur de signal activé par la protéine ob et un activateur d'élément de réponse d'ADN de transcription (STAT) couplé avec un gène marqueur; ou (b) pour un composé qui potentialise ou inhibe l'effet physiologique de la protéine ob, à évaluer l'effet du composé sur la réponse produite par la protéine ob, sur un élément de réponse d'ADN STAT activé par la protéine ob couplé avec un gène marqueur; où l'élément de réponse et le marqueur sont exprimés dans une lignée cellulaire réactive à la protéine ob, lignée sélectionnée à partir d'une liste constituée par: une lignée cellulaire de source hypothalamique; une lignée cellulaire de source phéochromocytomique; une lignée cellulaire de source hématopoïétique; une lignée cellulaire de source pancréatique; une lignée cellulaire de source hépatique; une lignée cellulaire de préadipocytes; une lignée cellulaire d'un muscle squelettique; une lignée cellulaire de source ovarienne; ou l'élément de réponse et le marqueur sont exprimés dans une lignée cellulaire (la lignée cellulaire modifiée génétiquement) qui est aussi transfectée avec un polypeptide capable de servir de médiateur dans la stimulation par la protéine ob d'un élément de réponse d'ADN STAT activé par la protéine ob et qui contient les protéines STAT appropriées.
Gowling Lafleur Henderson Llp
Smithkline Beecham P.l.c.
LandOfFree
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