Method for the expression of unknown environmental dna into...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/10 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01) C07K 14/195 (2006.01) C12N 9/22 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01) C12N 15/76 (2006.01)

Patent

CA 2492966

The present invention relates to methods for the identification or cloning of polynucleotides encoding a selected phenotype, particularly from environmental DNA. In a specific embodiment, the method comprises (i) cloning environmental DNA fragments into Ecoli cloning vectors to produce a metagenomic library, (ii) identifying or selecting cloning vectors in said library which contain DNA fragments having a particular characteristic of interest, (iii) modifying the identified or selected cloning vectors into shuttle or expression vectors for transfer and integration in a selected host cell, (iv) transferring the modified cloning vectors into said selected host cell and (v) identifying or cloning the DNA fragments contained in said modified cloning vectors which encode said selected phenotype in said selected host cell.

La présente invention concerne des méthodes d'identification ou de clonage de polynucléotides codant un phénotype sélectionné, provenant notamment d'ADN environnemental. Dans une forme de réalisation spécifique, la méthode consiste (i) à cloner des fragments d'ADN environnemental dans des vecteurs de clonage E.coli pour produire une bibliothèque métagénomique, (ii) à identifier ou à sélectionner des vecteurs de clonage dans ladite bibliothèque qui contiennent des fragments d'ADN ayant une caractéristique intéressante particulière, (iii) à modifier les vecteurs de clonage identifiés ou sélectionnés sous forme de vecteurs navettes ou de vecteurs d'expression pour le transfert et l'intégration dans une cellule hôte sélectionnée, (iv) à transférer les vecteurs de clonage modifiés dans ladite cellule hôte sélectionnée et (v) à identifier ou à cloner les fragments d'ADN contenus dans lesdits vecteurs de clonage modifiés qui codent ledit phénotype sélectionné dans ladite cellule hôte sélectionnée.

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