C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/70 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2329246
The present invention relates to the production of biomass for the isolation of ccc plasmid DNA comprising culturing a bacterial transformant in a bioreactor containing an antibiotic-free batch medium under batch-conditions and, at the end of the batch phase, feeding under feed-back conditions the portion of a feed-back medium after the rise of DO above a threshold-set point. Said feed-back medium comprises besides a carbon source a magnesium salt, preferably in concentrations above 20 mM. Preferably, the bacterial transformant is harvested after the end of the culture and frozen or freeze- dried. Also preferred is that ccc plasmid DNA is, optionally directly, isolated after harvesting the bacteria.
La présente invention concerne la production de biomasse pour l'isolement d'ADN plasmidique ccc (cercle fermé de façon covalente) consistant à mettre en culture un transformant bactérien dans un bioréacteur contenant un milieu de lot sans antibiotique dans des conditions sous forme de lot et, à la fin de la phase de lot, à ajouter dans des conditions de rétroaction la partie d'un milieu de rétroaction après la montée de OD au-dessus d'un point de seuil. Ledit milieu de rétroaction comprend, à part une source de carbone, un sel de magnésium, de préférence dans des concentrations supérieures à 20 mM. De préférence, le transformant bactérien est récolté après la fin de la culture et il est congelé ou lyophilisé. Il est également préféré que l'ADN plasmidique ccc soit, facultativement directement, isolé après la récolte des bactéries.
Flaschel Erwin
Friehs Karl
Schleef Martin
Schmidt Torsten
Fetherstonhaugh & Co.
Qiagen Gmbh
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2012251