Method for the production of multiply-unsaturated fatty...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/54 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) A23G 9/00 (2006.01) C11B 1/00 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/53 (2006.01) C12P 7/64 (2006.01)

Patent

CA 2533613

The invention relates to a method for the production of multiply-unsaturated fatty acids in an organism, into which nucleic acids have been introduced, which code for polypeptides with .DELTA.-5 elongase activity. Said nucleic acid sequences, optionally with further nucleic acid sequences, coding for polypeptides for the biosynthesis of fatty acids and lipid metabolism, are advantageously expressed in the organism. Nucleic acid sequences coding for a .DELTA.-6 desaturase, a .DELTA.-5 desaturase, .DELTA.-4 desaturase and/or .DELTA.-6 elongase activity are particularly advantageous and, advantageously, said saturases and elongases are derived from Thalassiosira, Euglena or Ostreococcus. The invention further relates to a method for the production of oils and/or triacylglycerides with an increased content of long-chain, multiply-unsaturated fatty acids. A particular embodiment of the invention is a method for the production of unsaturated .omega.-3 fatty acids and a method for the production of triglycerides with an increased content of unsaturated fatty acids, in particular, of .DELTA.-3 fatty acids with more than three double bonds. Also disclosed is the production of a transgenic organism, preferably a transgenic plant, or a transgenic microorganism with increased content of .omega.-3 fatty acids, oils or lipids with .omega.-3 double bonds as a result of the expression of the elongases and desaturases employed in the above method, preferably in combination with .omega.-3 desaturases, for example a .omega.-3 desaturase from fungi of the family Pythiaceae such as the genus Phytophtora, for example, the genus and species Phytophtora infestans, or a .omega.-3 desaturase from algae such as the family Prasinophyceae, for example, the genus Ostreococcus and, particularly, the genus and species Ostreococcus tauri or diatomaceae such as the genus Thalassiosira and, particularly, the genus and species Thalassiosira pseudonana. The invention also relates to the nucleic acid sequences, nucleic acid constructs, vectors and organisms containing the nucleic acid sequences and/or the nucleic acid constructs and transgenic organisms containing said nucleic acid sequences, nucleic acid constructs and/or vectors. A further part of the invention relates to oils, lipids and/or fatty acids produced according to the above method and use thereof and, furthermore, unsaturated fatty acids and triglycerides with an increased content of unsaturated fatty acids and use thereof.

La présente invention concerne un procédé de production d'acides gras polyinsaturés dans un organisme, procédé selon lequel des acides nucléiques codant pour des polypeptides présentant une activité de .DELTA.-5 élongase sont introduits dans ledit organisme. De façon avantageuse, ces séquences d'acide nucléique peuvent être exprimées dans l'organisme éventuellement avec d'autres séquences d'acide nucléique codant pour des EP0407957EP0407957 de la biosynthèse du métabolisme des acides gras et des lipides. Des séquences d'acide nucléique codant pour une activité de .DELTA.-6 désaturase, .DELTA.-5 désaturase, .DELTA.-4 désaturase et/ou .DELTA.-6 élongase sont particulièrement avantageuses. Ces désaturases et élongases sont dérivées de <i>Thalassiosira, Euglena </i>ou <i>Ostreococcus</i>. L'invention concerne en outre un procédé de production d'huiles et/ou de triacylglycérides présentant une teneur élevée en acides gras polyinsaturés à chaîne longue. De plus, la présente invention concerne, dans un mode de réalisation préféré, un procédé de production d'acides gras .omega.-3 insaturés, ainsi qu'un procédé de production de triglycérides présentant une teneur élevée en acides gras insaturés, en particulier d'acides gras .omega.-3 comportant plus de 3 doubles liaisons. L'invention concerne également la production d'un organisme transgénique, de préférence d'une plante transgénique, ou d'un micro-organisme transgénique présentant une teneur élevée en acides gras .omega.-3 insaturés, en huiles ou en lipides présentant des doubles liaisons .omega.-3 en raison de l'expression des élongases et des désaturases utilisées selon le procédé ci-dessus, de préférence en combinaison avec des désaturases .omega.-3, par exemple avec une désaturase .omega.-3 extraite de champignons de la famille des <i>Pythiaceae</i>, tels que du genre <i>Phytophtora, </i>par exemple du genre et de l'espèce<i> Phytophtora infestans</i>, ou bien avec une désaturase .omega.-3 extraite d'algues telles que de la famille des <i>Prasinophyceae</i>, par exemple du genre <i>Ostreococcus</i>, spécialement du genre et de l'espèce <i>Ostreococcus tauri</i>, ou de diatomées telles que du genre <i>Thalassiosira, </i>spécialement du genre et de l'espèce<i> Thalassiosira pseudonana</i>. L'invention concerne en outre les séquences d'acide nucléique, des constructions d'acide nucléique, des vecteurs et des organismes contenant les séquences d'acide nucléique selon l'invention, des vecteurs contenant les séquences d'acide nucléique et/ou les constructions d'acide nucléique, ainsi que des organismes transgéniques contenant les séquences d'acide nucléique, constructions d'acide nucléiques et/ou vecteurs selon l'invention. Une autre partie de l'invention concerne des huiles, des lipides et/ou des acides gras produits selon le procédé susmentionné, et leur utilisation. L'invention concerne aussi des acides gras insaturés ainsi que des triglycérides présentant une teneur élevée en acides gras insaturés, et leur utilisation.

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