C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) B01J 20/32 (2006.01) C12M 1/34 (2006.01) G01N 30/90 (2006.01)
Patent
CA 2465798
The invention relates to the field of diagnostics of nucleic acids, especially to a highly sensitive method for detecting, differentiating and characterizing nucleic acids in the form of a dry rapid test. The inventive dry rapid test contains a chromatographic material that comprises a sample reception zone, a separation zone including a binding area, in which one or more sequence- specific nucleic acid probes are immobilized, and a zone which absorbs a liquid down-stream of the separation zone including a binding area. According to the inventive method, the sequence-specific nucleic acid probes are immobilized via a polymer linker. The method comprises the following steps: i) denaturing, in the case of double-stranded nucleic acids, the nucleic acid to be detected and then neutralizing it, ii) applying the nucleic acid to be detected to the sample reception zone in a run buffer which contains mildly denaturing agents, iii) the nucleic acid moving from the sample reception zone in direction of the liquid-absorbing zone, (iv) contacting the nucleic acid to be detected in the binding area of the separation path with the sequence- specific nucleic acid probe and hybridizing it with the sequence-specific nucleic acid probe, v) detecting the nucleic acid or the hybridization of the nucleic acid with the sequence-specific nucleic acid probe via a label that is attached to the nucleic acid to be detected or via the detection of a label of the nucleic acid double strand. The invention further relates to a device for carrying out the method according to the invention.
L'invention concerne le dépistage d'acides nucléiques et, en particulier, un procédé de haute sensibilité pour détecter, différencier et caractériser des acides nucléiques, au moyen d'un test rapide à sec comportant un matériau chromatographique constitué des éléments suivants : - une zone de prise d'échantillon, - une zone de séparation avec un domaine de liaison dans lequel sont immobilisées une ou plusieurs sondes d'acide nucléique de séquence spécifique, et une zone située derrière la zone de séparation avec un domaine de liaison et absorbant le liquide. L'invention est caractérisée en ce que les sondes d'acide nucléique de séquence spécifique sont immobilisées par une liaison polymère, le procédé comprenant les opérations suivantes : i) l'acide nucléique à détecter est, dans le cas d'acides nucléiques à doubles chaînons, d'abord dénaturé puis neutralisé ; ii) l'acide nucléique à détecter est placé sur la zone de prise d'échantillon, dans un tampon mobile contenant des agents légèrement dénaturés ; iii) l'acide nucléique à détecter se déplace de la zone de prise d'échantillon vers la zone absorbant le liquide ; iv) l'acide nucléique à détecter entre en contact, dans le domaine de liaison de la zone de séparation, avec la sonde d'acide nucléique de séquence spécifique, avec laquelle il entre en hybridation ; v) l'acide nucléique à détecter ou l'hybridation de l'acide nucléique à détecter sur la sonde d'acide nucléique de séquence spécifique est détecté au moyen d'un marquage placé sur l'acide nucléique à détecter ou par repérage d'un marquage du double chaînon d'acide nucléique. La présente invention porte également sur un dispositif pour réaliser ledit procédé.
Goudreau Gage Dubuc
Hain Lifescience Gmbh
LandOfFree
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