Method of breeding yeast

Details Method of breeding yeast Method of breeding yeast

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/11 (2006.01) C12C 11/02 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01)

Patent

CA 2356594

A DNA construct comprising: (1) a selective marker gene, (2) a galactose-inducible growth inhibition sequence, (3) a pair of FRT sequences in the same orientation flanking (1) and (2), and (4) a DNA fragment capable of recombining with a yeast chromosomal DNA located at each end of (3), wherein said FRT sequences contain the following sequence: 5'-GAAGTTCCTATAC TTTCTAGA GAATAGGAACTTC-3' (SEQ ID NO: 1) inverted spacer inverted repeat (1) sequence repeat (2) or a sequence substantially identical to said sequence, provided that in each member of said pair of FRT sequences, the inverted repeat distal from the flanked selective marker gene and growth inhibition sequence has at least one but no more than six nucleotides deleted on the side distal from the spacer sequence; a method for transforming a yeast of the genus Saccharomyces with said DNA construct; a yeast of the genus Saccharomyces transformed by said method; and a method for producing a beer comprising using said yeast of the genus Saccharomyces.

Cette invention a trait à une produit de recombinaison d'ADN constitué, (1), d'un gène marqueur de criblage, (2), d'une séquence inhibitrice de prolifération pouvant être induite par du galactose, (3), d'une paire de séquences FRT situées dans une direction telle que (1) et (2) sont pris en sandwich, et (4), d'un ADN pouvant être recombiné par des ADN placés des deux côtés de (3). Ce produit de recombinaison se caractérise par le fait que les séquences FRT renferment la séquence suivante: 5'-GAAGTTCCTATAC TTTCTAGA GAATAGGAACTTC-3' (SEQ ID N·1) séquence de répétition séquence séquence de répétition inversée (1) d'espacement inversée (2) ou une séquence sensiblement identique, et par le fait que, dans chaque séquence FRT d'appariement, une des six bases a été supprimée du côté distal de la séquence d'espacement, dans la séquence de répétition inversée du côté distal du gène marqueur de criblage, ainsi que de la séquence inhibitrice de prolifération prise en sandwich entre elles. L'invention, qui concerne également une technique de transformation de levure appartenant au genre Saccharomyces, transformation réalisée au moyen de ce produit de recombinaison, porte, de surcroît, sur une levure appartenant au genre Saccharomyces ainsi transformée ainsi que sur un procédé de fabrication de bière faisant intervenir la levure appartenant au genre Saccharomyces.

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