Method of coupling polysaccharides to proteins

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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C07K 1/107 (2006.01) A61K 39/385 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) C07K 9/00 (2006.01)

Patent

CA 2274852

A novel method of covalently coupling polysaccharides to other biopolymers is provided, using an amino-thiol linker represented by formula (1): H2N-[(CH2)m-CHR1-CR2R3-A]q-CHR4-(CHR5)p-CHR6-S-R7 wherein A is a direct bond or a group having the formula -(Z-(CH2)m-CHR1-CHR2R3)n Z-, m is an integer from 0 to 5; n is an integer from 0 to 3; p is an integer from 0 to 2; q is the integer 0 or 1; R1 is hydrogen or C1-C6 alkyl, optionally substituted by amino, hydroxyl, carboxyl, C1-C4 alkoxycarbonyl, carbamoyl, mono- or di(C1-C4alkyl)carbamoyl or N-(.alpha.- carboxyalkyl)carbamoyl, or, if m .noteq. 0, R1 is hydroxyl, amino or peptidylamino; R2 and R3 are independently hydrogen or C1-C4 alkyl, or together form an oxo group; R4 is hydrogen, C1-C4 alkyl, carboxyl, C1-C4 alkoxycarbonyl, carbamoyl, mono- or di(C1-C4 alkyl)carbamoyl or N- (.alpha.-carboxyalkyl)carbamoyl; R5 is hydrogen, methyl, hydroxy or C1-C7 acyloxy; R6 is hydrogen or methyl; R7 is hydrogen or a thiol- protecting group or a group having the formula -S-CHR6-(CHR5)p-CHR4-[A-CR2R3-CHR1-(CH2)m]q-NH2; and z is imino, methylimino, oxygen or sulphur.

L'invention concerne un nouveau procédé servant à coupler de manière covalente des polysaccharides à d'autres biopolymères, au moyen d'un bras de liaison amino-thiol représenté par la formule (1): H2N-[(CH2)m-CHR<1>-CR<2>R<3>-A]q-CHR<4>-(CHR<5>)p-CHR<6>-S-R<7>, dans laquelle A représente une liaison directe ou un groupe possédant la formule -{Z-(CH2}m-CHR<1>-CHR<2>R<3>)nZ-, m est un nombre entier compris entre 0 et 5, n est un nombre entier compris entre 0 et 3, p est un nombre entier compris entre 0 et 2 et q vaut 0 ou 1, R<1> représente hydrogène ou alkyle C1-C6 éventuellement substitué par amino, hydroxyle, carboxyle, alcoxycarbonyle C1-C4, carbamoyle, mono ou di(alkyle C1-C4)carbamoyle ou N-( alpha -carboxyalkyl)carbamoyle, ou bien, si m ? 0, R<1> représente hydroxyle, amino ou peptidylamino, R<2> et R<3> représentent indépendamment hydrogène ou alkyle C1-C4, ou pris ensemble, ils forment un groupe oxo, R<4> représente hydrogène alkyle C1-C4, carboxyle, alcoxycarbonyle C1-C4, carbamoyle, mono ou di(alkyle C1-C4)carbamoyle ou N-( alpha -carboxyalkyl)carbamoyle, R<5> représente hydrogène, méthyle, hydroxy ou acyloxy C1-C7, R<6> représente hydrogène ou méthyle, R<7> représente hydrogène ou un groupe thiol protecteur, ou un groupe correspondant à la formule -S-CHR<6>-(CHR<5>)p-CHR<4>-[A-CR<2>R<3>-CHR<1>-(CH2)m]q-NH2, et Z représente imino, méthylimino, oxygène ou soufre.

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