Method of cryopreservation of blood vessels by vitrification

Details Method of cryopreservation of blood vessels by vitrification Method of cryopreservation of blood vessels by vitrification

A - Human Necessities

01

N

A01N 1/00 (2006.01) A01N 1/02 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01)

Patent

CA 2368884

A method for vitrification of a blood vessel includes immersing the blood vessel in increasing concentrations of cryoprotectant solution at a temperature greater than -15 ~C to a cryoprotectant concentration sufficient for vitrification; cooling the blood vessel at an average rate of from 30-60 ~C per minute to a temperature between -80 ~C and the glass transition temperature; and further cooling the blood vessel at an average rate less than 10 ~C per minute to a temperature below the glass transition temperature to vitrify the blood vessel. After the vitrified blood vessel has been stored, the blood vessel may be removed from vitrification by warming the blood vessel at an average rate of from 20-40 ~C per minute to a temperature between -80 ~C and the glass transition temperature; further warming the blood vessel at a rate of from 200-300 ~C per minute to a temperature above -15 ~C; and reducing the concentration of the cryoprotectant. Blood vessels treated in this manner exhibit near normal smooth muscle function, normal graft patency rates, and reduced levels of intimal hyperplasia.

L'invention se rapporte à une méthode de vitrification d'un vaisseau sanguin qui consiste à immerger le vaisseau sanguin dans des concentrations croissantes d'une solution de cryoprotecteur, à une température supérieure à -15 ·C, jusqu'à une concentration de cryoprotecteur suffisante pour permettre la vitrification; à refroidir le vaisseau sanguin à un rythme moyen de 30 à 60 ·C par minute jusqu'à une température comprise entre -80 ·C et la température de transition vitreuse; puis à refroidir encore le vaisseau sanguin à un rythme moyen inférieur à 10 ·C par minute jusqu'à une température inférieure à la température de transition vitreuse de façon à vitrifier le vaisseau sanguin. Après une période de stockage du vaisseau sanguin vitrifié, il est possible de supprimer la vitrification dudit vaisseau en chauffant celui-ci à un rythme moyen de 20 à 40 ·C par minute jusqu'à une température comprise entre -80 ·C et la température de transition vitreuse; puis à chauffer le vaisseau sanguin à un rythme de 200 à 300 ·C par minute jusqu'à une température supérieure à -15 ·C; et enfin à réduire la concentration du cryoprotecteur. Les vaisseaux sanguins traités de cette manière présentent une fonction normale du muscle lisse, des taux de perméabilité normaux à l'état de greffons et des niveaux réduits d'hyperplasie de l'intima.

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