Method of detection of cytochrome b mutations in funghi...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/53 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C07K 14/37 (2006.01) C07K 14/80 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G06F 17/30 (2006.01) G06F 19/00 (2006.01)

Patent

CA 2370117

The invention discloses methods which are particularly sensitive for detecting low frequencies of mutations in mitochondrially encoded genes, such as the cytochrome b gene, making these an especially useful and commercially important way of screening plant pathogenic fungi for the onset of fungicidal resistance wherein the resistance is due to a mutation in a mitochondrially encoded gene. The methods disclosed include single nucleotide polymorphism detection techniques especially PCR detection methods. Also disclosed are DNA sequences encoding part of the wild type and mutant cytochrome b sequences of a range of plant pathogenic fungi and the use of the sequence information to detect mutations giving rise to fungicidal resistance. Allele specific oligonucleotides and oligonucleotide probes, diagnostic primers and diagnostic kits are also disclosed.

La présente invention concerne des procédés particulièrement sensibles, destinés à la détection de mutations à fréquences faibles dans des gènes codés dans des mitochondries, tels que le gène du cytochrome b, ces procédés représentant une façon particulièrement utile et commercialement importante de cribler des champignons pathogènes de plantes en vue de révéler l'apparition d'une résistance fongicide, cette résistance étant due à une mutation dans un gène codé de mitochondrie. Les procédés comprennent des techniques de détection de polymorphisme de nucléotide unique, spécialement des méthodes de détection PCR. L'invention concerne aussi des séquences d'ADN codant pour une partie de la souche sauvage et des séquences mutantes de cytochrome b d'un certain nombre de champignons pathogènes de plantes, ainsi que l'utilisation de l'information de séquence afin de détecter des mutations donnant lieu à l'apparition de résistance fongicide. Elle concerne aussi des sondes d'oligonucléotides allèles spécifiques et d'oligonucléotide, des amorces de diagnostics et des nécessaires de diagnostics.

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