Method of determining amylase concentrations

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/40 (2006.01)

Patent

CA 2407563

A method for determining amylase concentrations is provided, comprising the steps of: (a) incubating a part of a specimen having an unknown amylase concentration at a specified temperature in a water-miscible buffered starch solution containing starch at a concentration of between 20-200 mg/litre; (b) allowing the thus-obtained mixture to react for a specified time period; (c) adding a portion of an aqueous iodine solution to this mixture to obtain a first sample; (d) preparing a second sample by adding another part of the specimen to a mixture comprising a second portion of the iodine solution and a second portion of the starch solution; (e) measuring the optical density of both samples at a wavelength between 300-800 nm; and(f) calculating the amylase activity in the specimen using a calibration curve,wherein both the first and the second sample containequal concentrations of the specimen and the starch solution. The time needed for carrying out this method is less than 10 minutes, preferably less than 6 minutes. This method is suitable for monitoring the amylase concentration in industrial cleaning processes.

Ce procédé permettant de déterminer les concentrations d'amylase comprend les étapes suivantes : (a) on incube une première partie d'un spécimen dont la concentration en amylase est inconnue à une température spécifiée, dans une solution d'amidon tamponnée contenant de l'amidon à une concentration comprise entre 20 et 200 mg/litre; (b) on laisse réagir ce mélange pendant un intervalle de temps spécifié; (c) on ajoute une portion de solution aqueuse d'iode à ce mélange de manière à obtenir un premier échantillon; (d) on prépare un second échantillon en ajoutant une seconde partie du spécimen à un mélange comprenant une seconde portion de solution d'iode et une seconde portion de solution d'amidon, (e) on mesure la densité optique des deux échantillons à une longueur d'ondes comprise entre 300 et 800 nm; et (f) on calcule l'activité de l'amylase dans le spécimen à l'aide d'une courbe d'étalonnage. Le premier et le second échantillon contiennent des concentrations identiques en spécimen et en solution d'amidon. Le temps nécessaire à la mise en oeuvre de ce procédé est inférieur à 10 minutes, et de préférence inférieur à 6 minutes. Ce procédé convient pour surveiller la concentration d'amylase dans les procédés de nettoyage industriel.

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