C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07H 19/00 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2458777
The present invention relates to a novel method for analyzing nucleic acid sequences based on real-time detection of DNA polymerase-catalyzed incorporation of each of the four nucleotide bases, supplied individually and serially in a microfluidic system, to a reaction cell containing a template system comprising a DNA fragment of unknown sequence and an oligonucleotide primer. Incorporation of a nucleotide base into the template system can be detected by any of a variety of methods including but not limited to fluorescence and chemiluminescence detection. Alternatively, microcalorimetic detection of the heat generated by the incorporation of a nucleotide into the extending template system using thermopile, thermistor and refractive index measurements can be used to detect extension reactions.
La présente invention concerne un nouveau procédé d'analyse de séquences d'acides nucléiques qui se fonde sur la détection en temps réel de l'introduction catalysée par l'ADN polymérase de chacune des quatre bases nucléotidiques, fournies individuellement et successivement dans un système microfluidique, dans une cellule de réaction contenant un système de matrice comprenant un fragment d'ADN de séquence inconnue ainsi qu'une amorce oligonucléotidique. L'introduction d'une base nucléotidique dans le système de matrice peut être détectée par l'un des nombreux procédés comprenant la détection par fluorescence et par chimiluminescence. Dans une variante, afin de détecter les réactions de développement, on peut utiliser la détection microcalorimétrique de la chaleur générée par l'introduction d'un nucléotide dans le système de matrice de développement au moyen d'une thermopile, d'une thermistance et de mesures de l'indice de réfraction.
Gould Ian
Hayes Mark A.
Taylor Thomas J.
Williams Daniel J.b.
Williams Peter
Arizona Board Of Regents
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1919934