Method of eliminating inhibitory/instability regions of mrna

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/67 (2006.01) A61K 31/70 (2006.01) A61K 39/21 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/16 (2006.01) C12N 15/49 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01)

Patent

CA 2132208

A method of locating an inhibitory/instability sequence or sequences within the coding region of an mRNA and modifying the gene encoding that mRNA to remove these inhibitory/instability sequences by making clustered nucleotide substitutions without altering the coding capacity of the gene is disclosed. Constructs containing these mutated genes and host cells containing these constructs are also disclosed. The method and constructs are exemplified by the mutation of a Human Immunodeficiency Virus-1 Rev-dependent gag gene to a Rev-independent gag gene. Constructs useful in locating inhibitory/instability sequences within either the coding region or the 3' untranslated region of an mRNA are also disclosed. The exemplified constructs of the invention may also be useful in HIV-1 immunotherapy and immunoprophylaxis.

L'invention concerne un procédé de localisation d'une ou plusieurs séquences d'inhibition/d'instabilité dans la région codante d'un ARNm et de modification du gène codant cet ARNm afin d'éliminer ces séquences d'inhibition/instabilité. Pour ce faire, on substitue les nucléotides groupés sans modifier la capacité codante du gène. Des produits de recombinaison contenant ces gènes mutants et des cellules-hôtes contenant ces produits de recombination sont également décrit. Ledit procédé et les produits de recombinaison selon l'invention sont illustrés par la mutation d'un gène humain GAG de VIH-1 dépendant d'un gène REV en un gène GAG ne dépendant pas d'un gène REV. Les produits de recombinaison utilisés dans la localisation de séquences d'inhibition/d'instabilité dans la région codante ou la région 3' non traduite d'un ARNm sont également décrits. Les produits de recombinaison cités en exemple selon l'invention peuvent également être utiles dans l'immunothérapie et l'immunoprophylaxie contre le VIH-1.

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