A - Human Necessities – 61 – K
Patent
A - Human Necessities
61
K
A61K 38/18 (2006.01) A61K 31/135 (2006.01) A61K 31/155 (2006.01) A61K 31/19 (2006.01) A61K 31/40 (2006.01) A61K 31/425 (2006.01) A61K 31/55 (2006.01) A61K 38/08 (2006.01) A61K 38/10 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2252469
The present invention provides methods and compositions for enhancing an effect or effects of a neurotrophin, preferably, but not limited to, enhancing the growth and survival promoting properties of neurotrophins. The cytoplasmic region of the common neurotrophin receptor (p75NTR) (rat, human, chick) contains a putative membrane-associating domain implicated in intracellular signalling. A peptide (R3) identical to this domain (p75NTR367-379) and various analogues of this peptide displayed circular dichroism spectra in aqueous and non-polar environments identical to the amphiphilic tetradecapeptide mastoparan (MP), and were internalized by PC12 rat pheochromocytoma cells. The R3 peptide enhanced neurite growth in PC12 cells, chick embryo primary sensory neurons, and fetal rat primary sensory neurons in vitro in the presence of sub-saturating concentrations of NGF. Peptide analogues of R3 not faithful to the distance and angular relationships of ionic groups, and the putative amphiphilic structure of p75NTR367-379, while still providing some enhancement, nevertheless displayed reduced potency to enhance NGF-mediated neurite growth. The common neurotrophin receptor p75NTR activates and translocates the nuclear transcription factor NFkB and displays pro-apoptotic effects similar to other members of the TNF receptor superfamily. A peptide mimic of the amphiphilic domain 367-379 of p75NTR that enhances TrkA mediated neurite growth by NGF, was used to affinity purify cytoplasmic proteins from PC12 cells. Isolated proteins contained a predominant species with an apparent molecular weight of 65 kDa. The affinity purified 65 kDa protein, as well as a protein of similar molecular mass from crude cell extracts, were identified by immunoblotting with antibody to NFkB. The 65 kDa species was chemically cross-linked to the radiolabeled analogue of the peptide mimic of p75NTR and immunoprecipitated by antibody to NFkB. These observations, taken together with the finding that a p75NTR-selective NGF antagonist blocked mediated neurite growth in limiting NGF conditions, support the view that p75NTR participates in neurite growth via a signaling pathway involving the translocation of NFkB.
L'invention concerne des procédés et des compositions permettant d'accroître l'activité d'une neurotrophine, de préférence mais non uniquement, d'accroître les propriétés de promotion de la croissance et de la survie que possèdent les neurotrophines. La zone cytoplasmique du récepteur commun des neurotrophines (p75?NTR¿) (rat, homme, poulet) contient un domaine associé à la membrane hypothétiquement impliqué dans la signalisation intracellulaire. Un peptide (R3) identique à ce domaine (p75?NTR¿367-379) et divers analogues dudit peptide ont présenté des spectres de dichroïsme circulaire dans des environnements aqueux et non polaires identiques à celui du mastoparane (MP), un tétradécapeptide amphiphile, et ont été incorporés par les cellules PC12 du phéochromocytome du rat. Le peptide R3 a amélioré la croissance des axones dans les cellules PC12, les neurones sensoriels primaires de l'embryon de poulet et les neurones sensoriels primaires du foetus de rat in vitro en présence de concentrations de sous-saturation de NGF. Des analogues peptidiques du R3 non fidèles aux relations de distance et d'angle des groupes ioniques, ainsi que la structure amphiphile présumée du p75?NTR¿367-379, tout en amenant une certaine augmentation, ont néanmoins présenté un moindre potentiel d'augmentation de la croissance des axones ayant pour médiateur le NGF. Le récepteur commun des neurotrophines p75?NTR¿ active et transloque le facteur de transcription nucléaire NFkB et présente une activité pro-apoptose similaire à celle des autres membres de la superfamille des récepteurs du TNF. Un peptide mimétique du domaine amphiphile 367-379 du p75?NTR¿, qui augmente la croissance des axones par le NGF ayant pour médiateur le TrK-A, a été utilisé pour purifier par affinité les protéines cytoplasmiques provenant des cellules PC12. Les protéines isolées contenaient une espèce prédominante de poids moléculaire apparent de 65 kDa. La protéine de 65 kDa purifiée par affinité, ainsi qu'une protéine de masse moléculaire voisine provenant d'extraits cellulaires bruts, ont été identifiées par immunotransfert avec des anticorps du NFkB. L'espèce de 65 kDa a été chimiquement réticulée à l'analogue radiomarqué du peptide mimétique du p75?NTR¿ et immunoprécipitée par l'anticorps du NFkB. Ces observations, associées à la découverte selon laquelle un antagoniste du NGF sélectif du p75?NTR¿ bloque la croissance des axones à médiation en limitant la quantité de NGF, confirment que la p75?NTR¿ participe à la croissance des axones via une voie de signalisation impliquant la translocation du NFkB.
Riopelle Richard J.
Ross Gregory M.
Shamovsky Igor L.
Weaver Donald F.
Hill & Schumacher
Queen's University At Kingston
LandOfFree
Method of enhancing effect of neurotrophin with analogues of... does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Method of enhancing effect of neurotrophin with analogues of..., we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Method of enhancing effect of neurotrophin with analogues of... will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1367086