Method of gene therapy using dna vectors without selection...

A - Human Necessities – 61 – K

Patent

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Details

A61K 48/00 (2006.01) A61K 9/12 (2006.01) A61K 31/70 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01)

Patent

CA 2197075

The use of a circular vector DNA to manufacture a drug to treat mammals or humans by gene therapy, wherein the vector DNA contains a selection marker gene and a DNA sequence that is heterologous for the vector and that causes a modulation, correction or activation of the expression of an endogenous gene or the expression of a gene introduced into the cells of the mammal or human by the vector DNA, is characterized in that the vector nucleic acid (a) is amplified under selection pressure and is split in such a way that said selection marker gene and said heterologous DNA are present on separate DNA fragments, (b) the DNA fragment that contains said heterologous DNA or both fragments are recircularized into vectors, (c) said DNA fragments are separated before or after the recircularizing, (d) the recircularized DNA fragment which contains said heterologous DNA is isolated and (e) the recircularized DNA fragment thus obtained is used to manufacture the drug.

L'invention concerne l'utilisation d'un ADN vectoriel circulaire afin de préparer un médicament de traitement par thérapie génique de mammifères ou d'êtres humains. L'ADN vectoriel contient un gène marqueur de sélection et une séquence d'ADN qui est hétérologue pour le vecteur et provoque une modulation, une correction ou une activation de l'expression d'un gène endogène ou l'expression d'un gène introduit par l'ADN vectoriel dans les cellules du mammifère ou de l'être humain. L'invention se caractérise en ce que l'acide nucléique vectoriel a) est amplifié par pression de sélection et est divisé de sorte que le gène marqueur de sélection mentionné et l'ADN hétérologue mentionné soient présents sur des fragments d'ADN séparés, b) le fragment d'ADN contenant l'ADN hétérologue mentionné ou les deux fragments sont recircularisés en vecteurs, c) les fragments d'ADN mentionnés sont séparés avant ou après la recircularisation, d) le fragment d'ADN recircularisé contenant l'ADN hétérologue mentionné est isolé et e) le fragment d'ADN recircularisé ainsi obtenu est utilisé pour la fabrication du médicament.

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