C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/53 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12Q 1/26 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2257180
A method for identifying a nucleotide sequence encoding a cytochrome P450, the cytochrome being inducible or suppressible in cells of a given type by an agent. The method includes: exposing a first group of the cells to the agent so as to induce or suppress expression of the cytochrome P450; isolating first mRNA from the cells; isolating second mRNA from a second group of the cells which have not been exposed to the agent so as to induce or suppress expression of the cytochrome P450; amplifying the first and second mRNA, respectively, in the presence of an oligo(dT) based first nucleic acid primer sufficient to prime synthesis from a poly(A) tail and a second nucleic acid primer substantially complementary to a nucleic acid sequence encoding a conserved region of a known cytochrome P450; displaying amplified products of the first mRNA and amplified products of the second mRNA to detect differences therebetween; and identifying said nucleotide sequence encoding said inducible or suppressible cytochrome P450.
L'invention porte sur un procédé d'identification d'une séquence nucléotidique codant pour le cytochrome P450, lequel peut être induit ou supprimé dans des cellules d'un type donné par un agent. Ledit procédé consiste à: exposer un premier groupe des cellules audit agent pour induire ou supprimer l'expression du cytochrome P450; isoler un premier ARNm desdites cellules; isoler un deuxième ARNm d'un deuxième groupe de cellules n'ayant pas étés exposées à l'agent de sorte que l'expression du cytochrome P450 soit induite ou supprimée; amplifier respectivement le premier et le deuxième ARNm en présence d'une première amorce d'acide nucléique à base d'oligo(dT) suffisante pour amorcer la synthèse sensiblement complémentaire d'une séquence nucléotidique codant pour une région conservée d'un cytochrome P450 connu; présenter les produits amplifiés du premier et du deuxième ARNm pour détecter les différences entre eux; et identifier lesdites séquences nucléotidiques codant pour lesdits cytochrome P450 susceptibles d'être induits ou supprimés.
Blake Cassels & Graydon Llp
Queen's University At Kingston
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1553062