C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/09 (2006.01)
Patent
CA 2715871
The invention provides a method for inserting a single stranded replacement nucleic acid into a target nucleic acid, said method comprising the steps of: a) generating a single stranded replacement nucleic acid from a double stranded nucleic acid, wherein the double stranded nucleic acid is adapted at one or both of its 5' ends such that preferential degradation of one strand and/or strand separation generates the single stranded replacement nucleic acid, wherein the single stranded replacement nucleic acid comprises a 5' region that is identical to sequence on the target nucleic acid, a 3' region that is identical to sequence on the target nucleic acid and optionally a replacement region between the 5' and 3' regions that is not identical to sequence on the target nucleic acid, b) exposing the target nucleic acid to the single stranded replacement nucleic acid under conditions suitable for re-combination to occur between the single stranded replacement nucleic acid and the target nucleic acid, and c) selecting a target nucleic acid whose sequence has been altered by inclusion of said single stranded replacement nucleic acid. Other methods for modifying target nucleic acids are also provided.
L'invention concerne un procédé d'insertion d'un acide nucléique de remplacement à simple brin dans un acide nucléique cible, ledit procédé comportant les étapes qui consistent à : a) produire un acide nucléique de remplacement à simple brin à partir d'un acide nucléique à double brin, l'acide nucléique à double brin étant adapté à l'une de ses extrémités 5' ou à ses deux extrémités 5' de telle sorte que la dégradation préférentielle d'un brin et/ou la séparation des brins fournisse l'acide nucléique de remplacement à simple brin, l'acide nucléique de remplacement à simple brin comprenant une région 5' identique à la séquence de l'acide nucléique cible, une région 3' identique à la séquence de l'acide nucléique cible et facultativement une région de remplacement entre la région 5' et la région 3', non identique à la séquence de l'acide nucléique cible, b) exposer l'acide nucléique cible à l'acide nucléique de remplacement à simple brin dans des conditions qui permettent la recombinaison de l'acide nucléique de remplacement à simple brin et de l'acide nucléique cible et c) sélectionner un acide nucléique cible dont la séquence a été modifiée par inclusion dudit acide nucléique de remplacement à simple brin. L'invention concerne également d'autres procédés de modification d'acides nucléiques cibles.
Erler Axel Steffen
Fu Jun
Maresca Marcello
Seibert Philipp Martin
Stewart Adrian Francis
Fasken Martineau Dumoulin Llp
Gene Bridges Gmbh
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2027856