Method of preparing oligonucleotide probes or primers,...

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C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/66 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2204637

A method of preparing a nucleic acid sequence capable of hybridizing to a target DNA sequence without requiring knowledge of this DNA sequence comprises the steps of ligating or otherwise linking a DNA fragment related to the target DNA sequence to a nucleotide sequence containing the recognition motif of an asymmetrically cleaving restriction enzyme, and subjecting the construct to the restriction enzyme to thereby cleave the construct within the target- related DNA fragment part thereof. A vector therefor comprises a site for insertion of the target-related DNA fragment, and a recognition sequence for an asymmetrically cleaving restriction enzyme or enzymes on one or both sides of said insertion site.

Un procédé de préparation de séquences d'acides nucléiques capables de former un hybride avec une séquence cible d'ADN, sans qu'il soit nécessaire de connaître la séquence de cet ADN, consiste à effectuer une ligature ou à lier d'une autre manière un fragment d'ADN correspondant à la séquence cible d'ADN à une séquence d'un oligonucléotide contenant le motif de reconnaissance d'une enzyme de restriction effectuant une scission asymétrique et ensuite à soumettre le produit d'assemblage à l'action de l'enzyme de restriction pour couper le produit d'assemblage à l'intérieur du fragment d'ADN correspondant à la cible. Dans ces conditions, un vecteur comprend un site pour insérer un fragment d'ADN correspondant à la cible et une séquence de reconnaissance pour un ou des enzymes de restriction effectuant une scission asymétrique sur un ou sur les deux côtés dudit site d'insertion.

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