C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/0735 (2010.01) A01K 67/02 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01)
Patent
CA 2660035
The present invention concerns a method of culturing embryonic stem (ES) cells of avian, comprising the steps of: a) suspending ES cells originating from the blastoderm disk of fertilized un-incubated avian egg(s) in a basal culture medium supplemented with: insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and ciliary neurotrophic factor (CNTF); and animal serum; and optionally, at least one growth factors selected in the group comprising interleukin 6 (Il-6), interleukin 6 receptor (Il-6R), stem cell factor (SCF), fibroblast growth factor (FGF), leukaemia inhibitory factor (LIF), interleukin 11 (Il-11), oncostatin and cardiotrophin; b) seeding the suspension of ES cells obtained in step a) on a layer of feeder cells and further culturing the ES cells for at least between 2 to 10 passages; c) optionally removing at least one growth factors selected SCF, FGF, Il-6, Il-6R, LIF, oncostatin and cardiotrophin and Il-11 from the culture medium; d) further culturing the ES cells in the medium of step c) on a layer of feeder cells.
La présente invention concerne une méthode de mise en culture de cellules souches embryonnaires (ES) d'aviaire, comprenant les étapes consistant à : a) mettre en suspension des cellules ES provenant du blastodisque d'un ou de plusieurs AEufs d'aviaire fertilisés non incubés dans un milieu de culture de base complémenté : de facteur de croissance 1 analogue à l'insuline (IGF-1) et de facteur neurotrophique ciliaire (CNTF); et de sérum animal ; et éventuellement, d'au moins un facteur de croissance choisi dans le groupe comprenant l'interleukine 6 (IL-6), le récepteur de l'interleukine 6 (IL-6R), le facteur de cellules souches (SCF), le facteur de croissance fibroblastique (FGF), le facteur inhibiteur de la leucémie (LIF), l'interleukine 11 (IL-11), l'oncostatine et la cardiotrophine ; b) ensemencer la suspension de cellules ES obtenue à l'étape a) sur une couche de cellules nourricières et poursuivre la culture des cellules ES pendant au moins 2 à 10 passages ; c) retirer éventuellement au moins un facteur de croissance choisi parmi le SCF, le FGF, l'IL-6, l'IL-6R, le LIF, l'oncostatine, la cardiotrophine et l'IL-11 du milieu de culture ; d) poursuivre la culture des cellules ES dans le milieu de l'étape c) sur une couche de cellules nourricières.
Batard Luc
Mehtali Majid
Valarche Isabelle
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
Vivalis
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1898121