Method of quickly detecting antigen using fluorescence...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/536 (2006.01) G01N 21/78 (2006.01) G01N 33/558 (2006.01)

Patent

CA 2621317

In detecting an antigen by using the fluorescence correlation spectroscopy (FCS) or the fluorescence cross-correlation spectroscopy (FCCS), it is intended to provide a method of quickly detecting the concentration of an arbitrary antigen in an antigen sample without resorting to stepwise examination on the concentration ratio of a detection reagent to the antigen to be detected, particularly in the case where the antigen concentration in the sample is unknown. A method of detecting an antigen by FCS or FCCS with the use of a fluorescent labeled complete antibody targeting an epitope of the antigen to be detected or a fluorescent labeled antibody fragment, which has been fluorescent labeled, and a non- fluorescent labeled complete antibody targeting another epitope of the above-described antigen or a fluorescent labeled complete antibody or a fluorescent labeled antibody fragment, which has been fluorescent labeled, as detection reagents, which comprises preparing a system (1) to which the detection reagents are exclusively added and another system (2) to which an antigen enabling the achievement of the maximum concentration of a trimer and the detection reagents are added, conducting fluorescent analysis, and then quickly detecting the presence or absence of the antigen in the sample based on the presence or absence of a trimer detection signal from a detector in the cases (1) and (2).

Pour détecter un antigène en utilisant la spectroscopie à corrélation en fluorescence (FCS) ou la spectroscopie à corrélation croisée en fluorescence (FCCS), l'invention entend proposer un procédé de détection rapide de la concentration d~un antigène arbitraire dans un échantillon d~antigène sans recourir à un examen progressif du rapport de concentration entre un réactif de détection et l~antigène à détecter, en particulier lorsque la concentration d~antigène dans l~échantillon est inconnue. Le procédé de détection d~un antigène par FCS ou FCCS en utilisant un anticorps complet étiqueté comme étant fluorescent ciblant un épitope de l~antigène à détecter ou un fragment d~anticorps étiqueté comme étant fluorescent, ayant été étiqueté comme étant fluorescent, et un anticorps complet étiqueté comme étant non fluorescent ciblant un autre épitope de l~antigène décrit ci-dessus, un anticorps complet étiqueté comme étant fluorescent ou un fragment d'anticorps étiqueté comme étant fluorescent, ayant été étiqueté comme étant fluorescent, comme réactifs de détection, consiste à élaborer un système (1) auquel seuls les réactifs de détection sont ajoutés et un autre système (2) auquel on ajoute un antigène permettant d~atteindre la concentration maximale d~un trimère et les réactifs de détection, à réaliser une analyse fluorescente, puis à détecter rapidement la présence ou l~absence de l~antigène dans l~échantillon sur la base de la présence ou de l~absence d~un signal de détection de trimère à partir d~un détecteur dans les cas (1) et (2).

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