Method of simultaneously detecting amplified nucleic acid...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2230816

In one aspect, the present invention provides an in situ process of simultaneously detecting a specific predetermined nucleic acid sequence and a specific predetermined cellular antigen in the same cell. In accordance with that process, the antigen is labeled with a biotin- or DNP-tagged antibody that specifically immunoreacts with the antigen, the specific nucleic acid sequences in the cell are amplified, the amplified nucleic acid sequences are labeled with a fluorescently-tagged nucleic acid probe that specifically hybridizes to the amplified nucleic acid sequences, and the labeled nucleic acid sequences and labeled cellular antigen are detected.

Selon l'un de ces aspects, l'invention porte sur un procédé in situ de détection simultanée d'une séquence nucléotidique prédéterminée et spécifique et d'un antigène cellulaire spécifique et prédéterminé dans la même cellule. Selon ce procédé, l'antigène est étiqueté à l'aide d'un anticorps marqué par une biotine ou par du dinitrophénol, qui produit une réaction immunitaire spécifique avec l'antigène. Les séquences nucléotidiques spécifiques de la cellule sont amplifiées, ces séquences amplifiées sont étiquetées à l'aide d'une sonde nucléotidique marquée par fluorescence qui s'hybrident spécifiquement avec les séquences nucléotidiques amplifiées, puis les séquences nucléotidiques étiquetées et l'antigène cellulaire étiqueté sont détectés.

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