Method to obtain male sterile plants

Details Method to obtain male sterile plants Method to obtain male sterile plants

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)

Patent

CA 2213394

A cell of a male-sterile plant having in its nuclear genome foreign DNA comprising i) a male-sterility gene encoding a sterility RNA, protein or polypeptide which, when produced or overproduced in a stamen cell of the plant, significantly disturbs the metabolism, functioning and/or development of the stamen cell, and, a sterility promoter directing expression of the male- sterility DNA selectively in specific stamen cells of said plant, the male-sterility DNA being in the same transcriptional unit as, and under the control of, the sterility promoter, and ii) a coregulating gene comprising a coregulating DNA encoding a coregulating RNA, protein or polypeptide which, when produced in plant cells wherein said sterility RNA, protein or polypeptide is produced, prevents the activity of said sterility RNA, protein or polypeptide, and a coregulating promoter which is selected from the group consisting of a promoter directing expression of said coregulating DNA in non-stamen cells of said plant, while directing low- level expression in said specific stamen cells; and a promoter consisting of a minimal promoter element, whereby said coregulating DNA is in a transcriptional unit which is different from the transcriptional unit of said sterility DNA.

Méthode permettant d'obtenir des plantes aux organes reproducteurs mâles stériles par la transformation du génome nucléaire de cellules végétales au moyen d'ADN étranger renfermant un gène de stérilité mâle, ce gène comprenant un fragment d'ADN de stérilité codant de l'ARN, une protéine ou un polypeptide de stérilité, de préférence la barnase, dont la production ou la surproduction dans une cellule staminale perturbe dans une mesure significative le métabolisme et (ou) le développement de la cellule en question; et un promoteur de stérilité pouvant sélectivement diriger l'expression de l'ADN de stérilité mâle dans certaines cellules staminales, spécialement dans les cellules des anthères et plus particulièrement dans celles de l'assise nutritive, le fragment d'ADN de stérilité mâle se trouvant dans la même unité de transcription que le promoteur de stérilité et étant contrôlé par celui-ci, et les plants de régénération transformés au moyen de l'ADN étranger issu de cellules ainsi transformées, la méthode se caractérisant par l'incorporation dans l'ADN étranger d'un gène co-régulateur renfermant de l'ADN co-régulateur codant de l'ARN, une protéine ou un polypeptide co-régulateur, de préférence le barstar, qui peut, lorsqu'il est produit dans des cellules végétales où est produit l'ARN, la protéine ou le polypeptide de stérilité, empêcher dans une mesure suffisante l'activité de l'ARN, de la protéine ou du polypeptide de stérilité en question, l'ADN co-régulateur étant de préférence sous le contrôle d'un promoteur sélectionné dans le groupe constitué d'un promoteur pouvant diriger l'expression de l'ADN co-régulateur en question dans des cellules autres que les cellules staminales, de préférence au moins dans la majorité des cellules non staminales, tout en dirigeant l'expression de faible intensité, et de préférence ne dirigeant aucune expression, dans les cellules staminales en question; un promoteur consistant en un élément promoteur minimal, de préférence un promoteur normalement exprimé dans les cellules végétales, particulièrement par l'entremise duquel l'ADN co-régulateur peut être placé sous le contrôle d'éléments stimulants dans le génome nucléaire du plant après intégration du fragment d'ADN étranger dans le génome du plant, le fragment d'ADN co-régulateur se trouvant dans une unité de transcription différente de celle qui renferme l'ADN de stérilité et, à la condition que, lorsque le fragment d'ADN étranger n'est pas sous le contrôle d'un promoteur pouvant diriger l'expression dans les cellules végétales, le gène co-régulateur en question est ainsi situé dans le fragment d'ADN étranger que, une fois inséré dans le génome de la plante, l'ADN co-régulateur peut être placé sous le contrôle des séquences de promoteurs présentes dans l'ADN voisinant l'ADN étranger en question dans le génome de la plante.

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