C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/57 (2006.01) C07K 7/06 (2006.01) C07K 7/08 (2006.01) C07K 11/00 (2006.01) C07K 14/18 (2006.01) C12N 9/50 (2006.01) C12Q 1/37 (2006.01)
Patent
CA 2228265
The process according to the present invention allows expression and isolation of polypeptides with the proteolytic activity of HCV NS3 protease in a pure, catalytically active form, and in amounts that are sufficient for discovery of NS3 protease inhibitors and for determination of the three-dimensional structure of the NS3 protease. A further subject of the present invention is a procedure that defines the chemical and physical conditions necessary for completion of the proteolytic activity of the above polypeptides. The invention further comprises new compositions of matter (expression vectors) containing nucleotide sequences capable of expressing the above mentioned polypeptides in culture cells. Finally, new compounds of matter are defined, suitable to measure the above proteolytic activity, and useful to develop NS3 protease inhibitors and therefore therapeutic agents for use against HCV. The figure shows the kinetic parameters of HCV NS3 protease using the S3 depsipeptide substrate (SEQ ID NO:45).
Procédé permettant l'expression et l'isolement de polypeptides par l'activité protéolytique de la VHC NS3 protéase sous une forme pure, active par catalyse, et dans des quantités suffisantes pour permettre la découverte d'inhibiteurs de la NS3 protéase et la détermination de la structure en trois dimensions de la NS3 protéase. L'invention concerne également une procédure définissant les conditions chimiques et physiques nécessaires à l'accomplissement de l'activité protéolytique des polypeptides cités. Sont décrites en outre de nouvelles compositions d'une matière (vecteurs d'expression) contenant des séquences de nucléotides capables d'exprimer les polypeptides cités, dans des cellules de culture. Enfin, on définit de nouveaux composés de matière, adaptés à la mesure de l'activité protéolytique citée, et utiles au développement d'inhibiteurs de la NS3 protéase, et constituant de ce fait des agents thérapeutiques utiles contre le VHC. La figure illustre les paramètres cinétiques de la VHC NS3 protéase au moyen du substrat S3 depsipeptide (SEQ ID NO:45)
Bianchi Elisabetta
de Francesco Raffaele
Narjes Frank
Pessi Antonello
Steinkuhler Christian
Fetherstonhaugh & Co.
Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.p.a.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1689881