C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/86 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/864 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)
Patent
CA 2304168
Methods for efficient production of recombinant AAV employ a host cell which comprises AAV rep and cap genes stably integrated within the cell's chromosomes, wherein the AAV rep and cap genes are each operatively linked to regulatory sequences capable of directing the expression of the rep and cap gene products upon infection of the cell with a helper virus, a helper gene, and a helper gene product. A method for producing recombinant adeno-associated virus (rAAV) involves infecting such a host cell with a helper virus, gene or gene product and infecting the infected host cell with a recombinant hybrid virus or plasmid vector containing adenovirus cis-elements necessary for replication and virion encapsidation, AAV sequences comprising the 5' and 3' ITRs of an AAV, and a selected gene operatively linked to regulatory sequences directing its expression, which is flanked by the above-mentioned AAV sequences.
L'invention concerne des procédés utiles pour produire de manière efficace des virus adéno-associés (AAV), qui utilisent une cellule hôte qui comporte des gènes rep et cap d'AAV intégrés de façon stable dans les chromosomes de la cellule, ces gènes rep et cap d'AAV étant liés chacun de manière fonctionnelle à des séquences de régulation capables de diriger l'expression de produits des gènes rep et cap après infection de la cellule par un virus assistant, un gène assistant et un produit de gène assistant. L'invention concerne un procédé de production d'un virus adéno-associé recombiné (rAAV), qui comporte les étapes consistant à infecter la cellule hôte à l'aide d'un virus assistant, d'un gène ou d'un produit de gène; infecter la cellule hôte infectée à l'aide d'un virus hybride recombiné ou d'un vecteur plasmidique contenant des éléments cis d'adénovirus nécessaires à la réplication et à l'encapsidation de virions, des séquences d'AAV comprenant les répétitions terminales inversées (ITR) 5' et 3' d'un AAV, et un gène sélectionné lié de manière fonctionnelle à des séquences de régulation dirigeant l'expression de celui-ci, qui est flanqué des séquences d'AAV susmentionnées.
Gao Guang-Ping
Wilson James M.
Gowling Lafleur Henderson Llp
The Trustees Of The University Of Pennsylvania
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1980010