Methods and compositions for nucleic acid amplification

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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Details

C12P 19/34 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2673017

Compositions that are used in nucleic acid amplification in vitro are disclosed, which include a target specific universal (TSU) promoter primer or promoter provider oligonucleotide that includes a target specific (TS) sequence that hybridizes specifically to a target sequence that is amplified and a universal (U) sequence that is introduced into the sequence that is amplified, by using a primer for the universal sequence. Methods of nucleic acid amplification in vitro are disclosed that use one or more TSU oligonucleotides to attached a U sequence to a target nucleic acid in a target capture step and then use a primer for a U sequence in subsequent amplification steps performed in substantially isothermal conditions to make amplification products that contain a U sequence that indicates the presence of the target nucleic acid in a sample.

L'invention concerne des compositions utilisées pour l'amplification d'acide nucléique in vitro et comportant un oligonucléotide amorce ou matrice de promoteur universel spécifique d'une cible (TSU), lequel comprend une séquence spécifique d'une cible (TS) qui s'hybride de manière spécifique avec une séquence cible amplifiée et avec une séquence universelle (U) introduite dans la séquence amplifiée, une amorce étant utilisée pour la séquence universelle. L'invention porte également sur des procédés d'amplification d'acide nucléique in vitro au moyen d'un ou de plusieurs oligonucléotides (TSU) pour lier une séquence U à un acide nucléique cible dans une opération de capture de cible, puis au moyen d'une amorce pour une séquence U dans des opérations d'amplifications subséquentes exécutées dans des conditions sensiblement isothermes pour réaliser des produits d'amplification contenant une séquence U qui indique la présence de l'acide nucléique cible dans un échantillon.

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