Methods and compositions relating to improved lentiviral...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/867 (2006.01) A61K 31/7088 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 1/02 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)

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CA 2456169

The present invention provides HIV-derived lentivectors which are multiply modified to create highly safe, efficient, and potent vectors for expressing transgenes for gene therapy. The lentiviral vector comprise various combinations of an inactive central polypurine tract, a stuffer sequence, which may encode drug susceptibility genes, and a mutated hairpin in the 5' leader sequence that substantially abolishes replication. These elements are provided in conjunction with other features of lentiviral vectors, such as a self-inactivating configuration for biosaftey and promoters such as the EF1.alpha. promoter as one example. Additional promoters are also described. The vectors can also comprise additional transcription enhancing elements such as the wood chuck hepatitis virus post-transcriptional regulatory element. These vectors therefore provide useful tools for genetic treatments for inherited and acquired disorders, gene-therapies for cancers and other disease, the creation of industrial and experimental production systems utilizing transformed cells, as well as for the study of basic cellular and genetic processes.

La présente invention porte sur des vecteurs lentiviraux dérivés du VIH qui subissent plusieurs modifications de façon à obtenir des vecteurs extrêmement sûrs, efficaces et puissants dans l'expression de transgènes en thérapie génique. Les vecteurs lentiviraux comprennent diverses combinaisons d'un tractus de polypurine central, inactif, une séquence de remplissage, qui peuvent coder des gènes sensibles aux médicaments, et une épingle à cheveux mutée de la séquence de tête 5' qui abolit pratiquement la réplication. Ces éléments sont obtenus conjointement à d'autres caractéristiques des vecteurs lentiviraux telles qu'une configuration d'auto-inactivation pour une biosécurité et des promoteurs tels que le promoteur EF1.alpha., par exemple. Des promoteurs additionnels sont également décrits. Les vecteurs peuvent également comprendre des éléments additionnels favorisant la transcription tel que l'élément régulateur post-transcriptionnel du virus de l'hépatite de la marmotte commune. Ces vecteurs fournissent donc des outils utiles dans les traitements génétiques des maladies héréditaires et congénitales, les thérapies géniques des cancers et autres pathologies, la création de systèmes de production industriels et expérimentaux utilisant des cellules transformées, ainsi que l'étude des processus basiques cellulaires et génétiques.

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