Methods and materials for expression of a recombinant protein

Details Methods and materials for expression of a recombinant protein Methods and materials for expression of a recombinant protein

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/869 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01)

Patent

CA 2631240

Recombinant expression vectors are provided comprising a 3' UTR of a light chain and an Epstein-Barr virus origin of replication. Also provided are host cells comprising such vectors and methods of producing recombinant protein with such vectors. Additional methods of producing a recombinant protein involve contacting cells with a first and second vector, each of which encode a different polypeptide chain, and wherein the second vector is present in an amount which is about 1.5 to 2.5 times as much as that of the first vector. Cells also can be transfected with a recombinant transient expression vector encoding a protein and are cultured in a medium in a membrane-enhanced culturing vessel to produce recombinant protein.

L'invention concerne des vecteurs d'expression de recombinaison comportant une région non traduite 3' (3' UTR) d'une chaîne légère et une origine de virus d'Epstein-Barr de répétition. L'invention concerne également des cellules hôtes comportant de tels vecteurs et des procédés de fabrication de protéines de recombinaison comportant de tels vecteurs. D'autres procédés de fabrication d'une protéine de recombinaison consistent à mettre les cellules en contact avec un premier et un deuxième vecteur codant chacun une chaîne polypeptidique différente, le deuxième vecteur étant présent dans une quantité 1,5 à 2,5 fois supérieure à celle du premier vecteur. Les cellules peuvent également être transfectées avec un vecteur d'expression transitoire de recombinaison codant une protéine et sont cultivées dans un milieu dans un récipient de culture à membrane de manière à produire une protéine de recombinaison.

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