C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/87 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01)
Patent
CA 2224907
The present invention provides a method of producing viral gene delivery vehicles which can be transferred to preselected cell types by using targeting conjugates. The gene delivery vehicules comprise: 1) the gene of interest (to be delivered); 2) a viral capsid or envelope carrying a member of a specific binding pair, the counterpart of which is not directly associated with the surface of the target cell. These vehicles can be made unable to bind to their natural receptor on the cell. The targeting conjugates are composed of the counterpart member of the specific binding pair linked to a targeting moiety which is a cell-type specific ligand (or fragments thereof). The number of the specific binding pair present on the viral vehicles can be for example an immunoglobulin binding moiety (e.g. capable of binding to a Fc fragment, protein A, protein G, FcR or an anti-Ig antibody), or biotin, avidin or streptavidin. The outer membrane or capsid of the virus may contain a substance which mediates entrance of the gene delivery vehicle into the target cell. Due to the specificity of the ligand, the high affinity of the binding pair and to the inability of the gene delivery vehicle to be targeted when used alone, the universality of the method for gene delivery, together with its high cell type selectively can easily be achievied by the use of various adequate targeting conjugates.
La présente invention concerne un procédé de production de véhicules d'apport de gène viraux pouvant être transférés à des types de cellules au moyen de conjugués de ciblage. Les véhicules d'apport de gènes comprennent: 1) le gène considéré (que l'on veut apporter), 2) une capside virale ou une enveloppe portant un élément d'une paire de liaison spécifique dont la contrepartie n'est pas directement associée à la surface de la cellule cible. Ces véhicules peuvent être rendus incapables de se lier à leur récepteur naturel sur la cellule. Les conjugués de ciblage sont constitués de l'élément contrepartie de la paire de liaison spécifique liée à une fraction de ciblage qui est un ligand spécifique d'un type de cellules (ou de fragments de ces cellules). Le nombre de paires de liaison spécifiques présentes sur le véhicule viral peut par exemple être une fraction de liaison de l'immunoglobuline (c'est-à-dire capable de se lier à un fragment Fc, à une protéine A, à une protéine F, FcR ou a un anticorps anti-Ig), ou la biotine, l'avidine ou la streptavidine. La membrane externe ou capside du virus peut contenir une substance induisant l'entrée du véhicule d'apport du gène dans la cellule cible. En raison de la spécificité du ligand, de l'affinité élevée de la paire de liaison, et de l'impossibilité du véhicule d'apport du gène à être ciblé lorsqu'il est utilisé seul, l'emploi de différents conjugués de ciblage appropriés permet de réaliser facilement un procédé universel d'apport de gène et d'autre part d'obtenir une haute sélectivité en fonction du type de cellule.
Valerio Domenico
Van Beusechem Victor Willem
Borden Ladner Gervais Llp
Crucell Holland B.v.
Introgene B.v.
LandOfFree
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