Methods for assaying protein-protein interactions

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 33/68 (2006.01) C12Q 1/66 (2006.01)

Patent

CA 2497880

The invention relates to methods and reagents for screening, identifying, and/or quantifying molecular interactions. In particular, the invention provides a method for identifying protein-protein interactions comprising prey proteins interacting with bait proteins comprising: (a) introducing one or more prey protein in cells, wherein a prey protein is labelled with an epitope tag permitting separation of the prey protein from other proteins in the cells; (b) introducing one or more bait protein in the cells, wherein a bait protein is labelled with a detectable substance permitting detection of protein-protein interactions comprising a prey protein and the bait protein; and (c) assaying for protein-protein interactions comprising a prey protein and bait protein by detecting the detectable substance.

L'invention concerne des procédés et des réactifs destinés à cribler, identifier, et/ou quantifier les interactions moléculaires. En particulier, l'invention concerne un procédé d'identification des interactions protéines-protéines comprenant des protéines proie interagissant avec des protéines appât. Ledit procédé comprend les étapes suivantes : (a) introduire une ou plusieurs protéines proie dans des cellules, ladite protéine proie étant marquée avec un épitope permettant la séparation de la protéine proie avec d'autres protéines présentes dans les cellules ; (b) introduire une ou plusieurs protéines appât dans des cellules, une protéine appât étant marquée par une substance détectable qui permet la détection d'interactions protéines-protéines comprenant une protéine proie et la protéine appât ; (c) analyser les interactions protéines-protéines comprenant une protéine proie et une protéine appât par détection la substance détectable.

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