Methods for determining the activity of complex mixtures

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C - Chemistry, Metallurgy

12

Q

C12Q 1/02 (2006.01) A01N 63/00 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) A01N 65/00 (2006.01)

Patent

CA 2344633

According to the present invention, the biological or pharmacological activity of a test material like a plant or herbal material, an extract of a plant or herbal material, a natural or synthetic compound or some combination thereof, can be quantified by observing the pattern of structural changes induced in a eukaryotic cell's proteins. These structural changes may be evidenced by protein phosphorylation, by protein-protein interactions and the like. The amount and nature of protein phosphorylation is qualitatively and quantitatively related to the in vitro concentration of biologically/pharmacologically active components to which the mammalian cells are exposed. Additionally, formation or loss of protein-protein complexes may be determined in whole cell homogenates through the use of nondenaturing electrophoresis and staining for proteins or protein phosphorylation. The present invention allows natural products to be formulated into nutritional supplements and pharmacological preparations of consistent biological/pharmacological activity without the need to identify any of the chemical constituents responsible for the biological or pharmacological response.

Selon la présente invention, il est possible de quantifier l'activité biologique ou pharmaceutique d'une substance à analyser, telle qu'une substance végétale ou à base d'herbes médicinales, un extrait de plante ou d'herbe médicinale, un composé naturel ou de synthèse ou une quelconque combinaison de ces produits par observation du schéma des changements structurels induits dans les protéines d'une cellule eucaryote. Ces changements structurels peuvent être mis en évidence par la phosphorylation des protéines, par les interactions protéine-protéine, etc. L'importance et la nature de la phosphorylation des protéines est associée qualitativement et quantitativement à la concentration in vitro en composants biologiquement/pharmaceutiquement actifs auxquels les cellules de mammifère sont exposées. En outre, la formation ou la disparition de complexes protéine-protéine peut être déterminée dans des homogénats de cellules entières par électrophorèse non dénaturante et par coloration des protéines ou par phosphorylation des protéines. La présente invention permet de formuler des produits naturels en des compléments nutritionnels et des préparations pharmacologiques présentant une activité biologique/pharmacologique stable sans qu'il soit besoin d'identifier l'un quelconque des composants chimiques responsables de la réaction biologique ou pharmacologique.

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