Methods for optimization of gene therapy by recursive...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/10 (2006.01) A61K 38/45 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01)

Patent

CA 2266423

The invention provides methods of evolving nucleic acids for use in gene therapy by recursive sequence recombination. Many of the methods evolve vectors, both viral and nonviral, to have improved properties. For example, vectors are evolved to have improved properties of viral titer, infectivity, expression of a gene within a vector, tissue specificity, viral genome capacity, episomal retention, lack of immunogenicity of the vectors or an expression product thereof, site-specific integration, increased stability, or capacity to confer cellular resistance to microorganism infection. The invention further provides a phagemidadenovirus capable of generating single stranded DNA greater than 10 kilobases comprising an adenovirus and a phage f1 replication origin.

L'invention concerne des procédés de mise au point d'acides nucléiques destinés à être utilisés dans une thérapie génique grâce à une recombinaison récursive de séquences. Beaucoup de ces procédés mettent au point des vecteurs aussi bien viraux que non viraux, afin de présenter des propriétés perfectionnées. Par exemple, des vecteurs sont mis au point pour présenter des propriétés perfectionnées de titres viraux, d'infectivité, d'expression d'un gène dans un vecteur, de spécificité de tissu, de capacité de génome viral, de rétention épisomique, de manque d'immunogénicité des vecteurs ou d'un produit d'expression de ces vecteurs, d'intégration spécifique du milieu, de stabilité accrue, ou de capacité à conférer une résistance cellulaire à une infection causée par des micro-organismes. L'invention concerne également un adénovirus-phagémide susceptible de générer un ADN à un brin supérieur à 10 kilobases comprenant un adénovirus et une origine de réplication en phage f1.

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