Methods for producing recombinant insulin from novel fusion...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/17 (2006.01) C07K 14/575 (2006.01) C07K 14/62 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/03 (2006.01)

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CA 2372221

A DNA encoding a fused protein of formula (I) comprising a leader peptide sequence (Y) consisting of at least one amino acid residue for the expression and secretion of the protein, an amino acid sequence (X1) to be used in enzymatic or chemical cleavage, an amino acid sequence (B-chain) of insulin B chain, an amino acid sequence (X2) to be used in enzymatic cleavage, a linker sequence (Linker) consisting of at least one amino acid residue, an amino acid sequence (X3) to be used in enzymatic cleavage, and an amino acid sequence (A- chain) of insulin A chain, which are linked to each other in this order; and a process for producing insulin by using an expression system containing this DNA: [Y]-[X1]-[B-chain]-[X2]-[Linker]-[X3]-[A-chain] (Formula 1). Thus, a process for efficiently producing gene recombinant insulin at a high productivity is provided.

La présente invention concerne de l'ADN codant pour une protéine fusionnée représenté par la formule (I), comprenant une séquence peptidique de tête (Y) consistant au moins en un résidu d'acide aminé pour l'expression et la sécrétion de la protéine, une séquence d'acide aminé (X1) devant être utilisée dans le clivage enzymatique ou chimique, une séquence d'acide aminé (chaîne B) de chaîne B d'insuline, une séquence d'acide aminé (X2) devant être utilisée dans le clivage enzymatique, une séquence de liaison (élément de liaison) consistant au moins en un résidu d'acide aminé, une séquence d'acide aminé (X3) devant être utilisée dans le clivage enzymatique, et une séquence d'acide aminé (chaîne A) de chaîne A d'insuline, liées ensemble dans cet ordre. En outre, cette invention concerne un procédé de production d'insuline utilisant le système d'expression contenant cet ADN: [Y] - [X1] - [chaîne B] - [X2] - [élément de liaison] - [X3] - [chaîne A] (formule 1). En l'occurrence, ce procédé permet de produire efficacement de l'insuline à gène recombiné à un niveau de productivité élevé.

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