Methods for purification of cells based on product secretion

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/00 (2006.01)

Patent

CA 2559736

The invention provides methods for purifying one or more cells based on the level of one or more products secreted by the cells. In one embodiment, the method involves (a) contacting a plurality of cells immobilized in proximity to a capture matrix, the capture matrix capable of localizing a product secreted by one or more of the cells, with an agent that selectively binds to the product, the agent capable of generating a signal detectable as a property of light; (b) illuminating a population of the cells, the population contained in a frame; (c) detecting two or more properties of light directed from the frame, wherein a first property of light identifies substantially all cells of the population, and the second property of light identifies product localized to the capture matrix; (d) locating (i) substantially all cells of the population with reference to the detected first property of light, and (ii) one or more selected cells with reference to the detected second property of light, and (e) irradiating the non-selected cells, wherein each non-selected cell receives a substantially lethal dose of radiation, whereby one or more selected cells having a desired product secretion profile are purified.

L'invention concerne des méthodes destinées à purifier une ou plusieurs cellules sur la base du niveau d'un ou plusieurs produits sécrétés par ces cellules. Dans un mode de réalisation, la méthode consiste (a) à mettre une pluralité de cellules immobilisées au voisinage d'une matrice de capture permettant de localiser un produit sécrété par une ou plusieurs de ces cellules en contact avec un agent se liant sélectivement au produit, cet agent pouvant générer un signal détectable sous la forme d'une propriété de lumière, (b) à éclairer une population de ces cellules, cette population étant contenue dans une structure, (c) à détecter deux ou plusieurs propriétés de la lumière émise à partir de la structure, une première propriété de lumière identifiant sensiblement toutes les cellules de la population, la seconde propriété de lumière identifiant le produit localisé par rapport à la matrice de capture, (d) à localiser (i) sensiblement toutes les cellules de la population par rapport à la première propriété de lumière détectée, et (ii) une ou plusieurs cellules sélectionnées par rapport à la seconde propriété de lumière détectée, et (e) à irradier les cellules non sélectionnées, chacune des cellules non sélectionnées recevant une dose sensiblement létale de rayonnement, ce qui permet de purifier une ou plusieurs cellules sélectionnées présentant un profil de sécrétion de produit souhaité.

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