C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/85 (2006.01)
Patent
CA 2753813
The invention pertains to a method for selecting at least one eukaryotic host cell expressing a product of interest, comprising (a) providing a plurality of eukaryotic host cells, wherein cellular viability of said host cells is dependent upon folate uptake, wherein said host cells comprise at least (i) a foreign polynucleotide encoding a product of interest and (ii) a foreign polynucleotide encoding a DHFR enzyme; (b) culturing said plurality of eukaryotic host cells in a selective culture medium comprising at least an inhibitor of DHFR and folate in a limiting concentration; and (c) selecting at least one eukaryotic host cell expressing the product of interest. Also provided is a method for expressing a product of interest which is based on host cells selected by said method and a cell culture medium.
La présente invention concerne un procédé de sélection d'au moins une cellule hôte eucaryote exprimant un produit intéressant, comprenant les étapes consistant à (a) fournir une pluralité de cellules hôtes eucaryotes, la viabilité cellulaire desdites cellules hôtes dépendant de la capture de l'acide folique, lesdites cellules hôtes comprenant au moins (i) un polynucléotide étranger codant pour un produit intéressant et (ii) un polynucléotide étranger codant pour une enzyme DHFR; (b) cultiver ladite pluralité de cellules hôtes eucaryotes dans un milieu de culture sélectif comprenant au moins un inhibiteur de la DHFR et de l'acide folique en une concentration limitante; et (c) choisir au moins une cellule hôte eucaryote exprimant le produit intéressant. L'invention concerne également un procédé pour exprimer un produit intéressant qui est basé sur les cellules hôtes choisies par ledit procédé et un milieu de culture cellulaire.
Jostock Thomas
Knopf Hans-Peter
Fetherstonhaugh & Co.
Novartis Ag
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2059603