Methods for the identification of lrrk2 interacting...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/48 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2645214

The invention provides in a first aspect a method for the identification of an LRRK2 interacting compound, comprising the steps of providing a protein preparation containing LRRK2, contacting the protein preparation with indol ligand 91 immobilized on a solid support under conditions allowing the formation of an indol ligand 91-LRRK2 complex, incubating the indol ligand 91-LRRK2 complex with a given compound, and determining whether the compound is able to separate LRRK2 from the immobilized indol ligand 91. Furthermore, the invention relates to a method for the identification of an LRRK2 interacting compound, comprising the steps of providing a protein preparation containing LRRK2, contacting the protein preparation with indol ligand 91 immobilized on a solid support and with a given compound under conditions allowing the formation of an indol ligand 91-LRRK2 complex, and detecting the indol ligand 91-LRRK2 complex. Additionally, the invention provides a method for the identification of an LRRK2 interacting compound, comprising the steps of providing two aliquots of a protein preparation containing LRRK2, contacting one aliquot with indol ligand 91 immobilized on a solid support under conditions allowing the formation of an indol ligand 91-LRRK2 complex, contacting the other aliquot with indol ligand 91 immobilized on a solid support and with a given compound under conditions allowing the formation of an indol ligand 91- LRRK2 complex, and determining the amount of indol ligand 91-LRRK2 complex. Furthermore, the invention relates to a method for the purification of LRRK2, comprising the steps of providing a protein preparation containing LRRK2, contacting the protein preparation with indol ligand 91 immobilized on a solid support under conditions allowing the formation of an indol ligand 91-LRRK2 complex, and separating LRRK2 from the immobilized indol ligand 91.

L'invention concerne dans un premier aspect un procédé pour l'identification d'un composé interagissant avec la LRRK2, comprenant les étapes consistant à obtenir une préparation de protéines contenant la LRRK2, mettre en contact la préparation de protéines avec le ligand indolique 91 immobilisé sur un support solide dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand indolique 91-LRRK2, incuber le complexe ligand indolique 91-LRRK2 avec un composé donné et déterminer si le composé est capable de séparer la LRRK2 du ligand indolique 91 immobilisé. En outre, l'invention concerne un procédé pour l'identification d'un composé interagissant avec la LRRK2, comprenant les étapes consistant à obtenir une préparation de protéines contenant la LRRK2, mettre en contact la préparation de protéines avec le ligand indolique 91 immobilisé sur un support solide et avec un composé donné dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand indolique 91-LRRK2 et détecter le complexe ligand indolique 91-LRRK2. En plus, l'invention concerne un procédé pour l'identification d'un composé interagissant avec la LRRK2, comprenant les étapes consistant à obtenir deux portions d'une préparation de protéines contenant la LRRK2, mettre en contact une portion avec le ligand indolique 91 immobilisé sur un support solide dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand indolique 91-LRRK2, mettre en contact l'autre portion avec le ligand indolique 91 immobilisé sur un support solide et avec un composé donné dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand indolique 91-LRRK2 et déterminer la quantité de complexe ligand indolique 91-LRRK2. En outre, l'invention concerne un procédé pour la purification de LRRK2, comprenant les étapes consistant à obtenir une préparation de protéines contenant la LRRK2, mettre en contact la préparation de protéines avec le ligand indolique 91 immobilisé sur un support solide dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand indolique 91-LRRK2 et séparer la LRRK2 du ligand indolique 91 immobilisé.

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