G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/573 (2006.01) C12Q 1/48 (2006.01)
Patent
CA 2658904
The present invention relates to a method for the identification of a PI3K interacting compound, comprising the steps of a) providing a protein preparation containing PI3K, b) contacting the protein preparation with phenylthiazole ligand 1 immobilized on a solid support under conditions allowing the formation of a phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex, c) incubating the phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex with a given compound, and d) determining whether the compound is able to separate PI3K from the immobilized phenylthiazole ligand 1. Furthermore, the present invention relates to a method for the identification of a PI3K interacting compound, comprising the steps of a) providing a protein preparation containing PI3K, b) contacting the protein preparation with phenylthiazole ligand 1 immobilized on a solid support and with a given compound under conditions allowing the formation of a phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex, and c) detecting the phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex formed in step b). Furthermore, the present invention relates to a method for the identification of a PI3 K interacting compound, comprising the steps of a) providing two aliquots of a protein preparation containing PI3K, b) contacting one aliquot with the phenylthiazole ligand 1 immobilized on a solid support under conditions allowing the formation of a phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex, c) contacting the other aliquot with the phenylthiazole ligand 1 immobilized on a solid support and with a given compound under conditions allowing the formation of a phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex, and d) determining the amount of the phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex formed in steps b) and c). Furthermore, the present invention realtes to a method for the identification of a PI3K interacting compound, comprising the steps of a) providing two aliquots comprising each at least one cell containing PI3K, b) incubating one aliquot with a given compound, c) harvesting the cells of each aliquot, d) lysing the cells in order to obtain protein preparations, e) contacting the protein preparations with the phenylthiazole ligand 1 immobilized on a solid support under conditions allowing the formation of a phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex, and f) determining the amount of the phenylthiazole ligand 1 - PI3K complex formed in each aliquot in step e).
La présente invention concerne un procédé d'identification d'un composé interagissant avec la protéine kinase PI3K, le procédé comportant les étapes qui consistent à a) élaborer une préparation de protéines contenant PI3K, b) mettre la préparation de protéines en contact avec un ligand 1 de phénylthiazole immobilisé sur un support solide dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K, c) incuber le complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K avec un composé donné, et d) déterminer si le composé est capable de séparer la PI3K du ligand 1 de phénylthiazole immobilisé. De plus, la présente invention concerne un procédé d'identification d'un composé interagissant avec PI3K, le procédé comportant les étapes qui consistent à a) élaborer une préparation de protéines contenant PI3K, b) mettre la préparation de protéines en contact avec un ligand 1 de phénylthiazole immobilisé sur un support solide et avec un composé donné dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K, et c) détecter le complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K formé au cours de l'étape b). De plus, la présente invention concerne un procédé d'identification d'un composé interagissant avec PI3K, le procédé comportant les étapes qui consistent à a) produire deux aliquotes d'une préparation de protéines contenant PI3K, b) mettre une aliquote en contact avec le ligand 1 de phénylthiazole immobilisé sur un support solide dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K, c) mettre l'autre aliquote en contact avec le ligand 1 de phénylthiazole immobilisé sur un support solide et avec un composé donné dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K, et d) déterminer la quantité du complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K formé au cours des étapes b) et c). De plus, la présente invention concerne un procédé d'identification d'un composé interagissant avec PI3K, le procédé comportant les étapes qui consistent à a) produire deux aliquotes contenant chacune au moins une cellule renfermant PI3K, b) incuber une aliquote avec un composé donné, c) recueillir les cellules de chaque aliquote, d) lyser les cellules afin d'obtenir une préparation de protéines, e) mettre la préparation de protéines en contact avec le ligand 1 de phénylthiazole immobilisé sur un support solide dans des conditions permettant la formation d'un complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K, et f) déterminer la quantité du complexe ligand 1 de phénylthiazole - PI3K formé dans chaque aliquote au cours de l'étape e).
Bergamini Moore Giovanna
Cansfield Andrew
Neubauer Gitte
Ramsden Nigel
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Cellzome Ag
LandOfFree
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