C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/54 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2287542
The present invention is generally related to compositions and methods for the reverse transcription of nucleic acid molecules, especially messenger RNA molecules. Specifically, the invention relates to compositions comprising mixtures of polypeptides having reverse transcriptase (RT) activity, and to methods of producing, amplifying or sequencing nucleic acid molecules (particularly cDNA molecules) using these compositions or polypeptides, particularly at temperatures above about 55 ~C. The invention also relates to nucleic acid molecules produced by these methods, to vectors and host cells comprising these nucleic acid molecules, and to the use of such nucleic acid molecules to produce desired polypeptides. The invention also relates to methods for producing Rous Sarcoma Virus (RSV) and Avian Myeloblastosis Virus (AMV) RTs or other Avian Sarcoma-Leukosis Virus (ASLV) RTs (.alpha. and/or .beta. subunits thereof), to isolated nucleic acid molecules encoding such RSV RT, AMV RT or other ASLV RT subunits, to vectors and host cells comprising these isolated nucleic acid molecules and to RSV RT, AMV RT and other ASLV RT subunits produced by these methods. The invention further relates to nucleic acid molecules encoding recombinant heterodimeric RT holoenzymes, particularly heterodimeric RSV RTs, AMV RTs or other ASLV RTs (which may be .alpha..beta. RTs, .beta..beta. RTs, or .alpha. RTs), vectors (particularly baculovirus vectors) and host cells (particularly insect and yeast cells) comprising these nucleic acid molecules, methods for producing these heterodimeric RTs and heterodimeric RTs produced by these methods. The invention also relates to kits comprising the compositions, polypeptides, or RSV RTs, AMV RTs or other ASLV RTs of the invention.
La présente invention porte sur des compositions et des procédés de transcription inverse de molécules d'acide nucléique, notamment des molécules d'ARN messager. De manière spécifique, cette invention porte sur des compositions comprenant des mélanges de polypeptides ayant une activité de transcriptase inverse (RT), et sur des procédés de production, d'amplification ou de séquençage de molécules d'acide nucléique (notamment des molécules d'ADNc) utilisant ces compositions ou polypeptides, à des températures supérieures à environ 55 ·C. L'invention porte, d'autre part, sur des molécules d'acide nucléique produites par ces procédés, sur des vecteurs et des cellules hôtes comprenant ces molécules d'acide nucléique, et sur l'utilisation de ces molécules d'acide nucléique pour produire les polypeptides désirés. L'invention porte également sur des procédés de production du virus du sarcome de Rous (RSV) et sur la transcriptase inverse du virus de la myéloblastose aviaire (AMV) ou sur d'autres transcriptases inverses du virus aviaire du groupe sarcome-leucose (ASLV) (sur leurs sous-unités .alpha. et/ou .beta.), sur des molécules d'acide nucléique isolées codant la transcriptase inverse de RSV, AMV ou autres sous-unités de transcriptase inverse d'ASLV obtenues selon ces procédés. Cette invention porte encore sur des molécules d'acide nucléique codant des holoenzymes hétérodimères recombinées à transcriptase inverse, notamment les transcriptases inverses de RSV hétérodimères, d'AMV ou ASLV (qui peuvent être des transcriptases inverses .alpha..beta., .beta..beta., ou .alpha.), sur des vecteurs (notamment des vecteurs de baculovirus) et sur des cellules hôtes (notamment des cellules de levures et d'insectes) comprenant ces molécules d'acide nucléique, sur des procédés de production de ces transcriptases inverses hétérodimères. L'invention porte enfin sur des kits comprenant les compositions, les polypeptides ou les transcriptases inverses de RSV, AMV ou ASLV de l'invention.
Chatterjee Deb K.
Gerard Gary F.
Smith Michael D.
Invitrogen Corporation
Life Technologies Inc.
Mbm Intellectual Property Law Llp
LandOfFree
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