Methods of increasing secretion of polypeptides having...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 14/39 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 15/80 (2006.01)

Patent

CA 2658610

The present invention relates to methods for producing a secreted polypeptide having biological activity, comprising: (a) transforming a fungal host cell with a fusion protein construct encoding a fusion protein, which comprises: (i) a first polynucleotide encoding a signal peptide; (ii) a second polynucleotide encoding at least a catalytic domain of an endoglucanase or a portion thereof; and (iii) a third polynucleotide encoding at least a catalytic domain of a polypeptide having biological activity; wherein the signal peptide and at least the catalytic domain of the endoglucanase increases secretion of the polypeptide having biological activity compared to the absence of at least the catalytic domain of the endoglucanase; (b) cultivating the transformed fungal host cell under conditions suitable for production of the fusion protein; and (c) recovering the fusion protein, a component thereof, or a combination thereof, having biological activity, from the cultivation medium.

La présente invention concerne des procédés de production d'un polypeptide secrété présentant une activité biologique, comprenant : (a) la transformation d'une cellule hôte fongique avec une construction de protéine de fusion codant pour une protéine de fusion, comprenant : (i) un premier polynucléotide codant pour un peptide signal ; (ii) un deuxième polynucléotide codant pour au moins un domaine catalytique d'un endoglucanase ou une partie de ce domaine ; et (iii) un troisième polynucléotide codant pour au moins un domaine catalytique d'un polypeptide ayant une activité biologique ; ledit peptide signal et au moins le domaine catalytique de l'endoglucanase augmentant la sécrétion du polypeptide ayant une activité biologique en comparaison de l'absence d'au moins le domaine catalytique de l'endoglucanase ; (b) la culture de la cellule hôte fongique transformée dans des conditions appropriées pour la production de la protéine de fusion ; et (c) la récupération de la protéine de fusion, d'un de ses composants ou d'un de leurs mélanges, ayant une activité biologique, dans le milieu de culture.

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