C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/66 (2006.01)
Patent
CA 2703785
The invention relates to methods, reagents and kits for detecting enzyme activity using bioluminescence. In particular, it relates to a novel luciferase assay system with reduced background luminescence to allow for increased detection sensitivity. Provided is a method of detecting luciferase activity in a sample using coelenterazine or an analog thereof as a substrate, comprising: (a) initiating luciferase-catalyzed luminescence production by contacting said sample with a luciferase detection reagent to yield a reaction mixture, said reagent comprising coelenterazine and at least one iodide source in an amount sufficient to reduce the autoluminescence of said coelenterazine, (b) incubating said reagent mixture under conditions suitable to produce luminescence, and (c) measuring the luminescence produced. Also provided are detections reagents and kits for use in such a method.
La présente invention concerne des procédés, des réactifs et des trousses permettant la détection d'activité enzymatique par bioluminescence. En particulier, l'invention concerne un nouveau système de dosage de luciférase avec une luminescence de fond réduite pour assurer une meilleure sensibilité de détection. L'invention concerne un procédé de détection d'activité de luciférase dans un échantillon par utilisation, en tant que substrat, de coelenterazine ou d'un analogue de celle-ci, qui comprend : (a) l'amorce d'une production de luminescence catalysée par la luciférase par la mise en contact dudit échantillon avec un réactif de détection de luciférase pour obtenir un mélange réactionnel, ledit réactif comportant de la coelenterazine et au moins une source d'iodure en une quantité suffisante pour réduire l'auto-luminescence de ladite coelenterazine; (b) l'incubation dudit mélange de réactif dans des conditions appropriées pour produire une luminescence; et (c) la mesure de la luminescence produite. L'invention concerne également des réactifs et des trousses de détection destinés à être utilisés dans le cadre d'un tel procédé.
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
Perkinelmer Health Sciences B.v.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1519092