C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) A61K 35/74 (2006.01) A61K 38/16 (2006.01) A61K 39/08 (2006.01) A61P 31/04 (2006.01) C07K 14/33 (2006.01) C07K 14/335 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01)
Patent
CA 2471916
Modified bacterial surface layer (S-layer) proteins are disclosed where the modification is the insertion, at an internal location, of a heterologous polypeptide, or polypeptide of interest. The polypeptide is a binding or target protein, such as an antigen or antibody, or part thereof, in particular a bacterial antigen (e.g. from Clostridium tetani such as TTFC). The modified surface layer protein can then be expressed on the surface of the bacterial cell and used in a vaccine. Also disclosed are bacteria which have been modified to express a heterologous surface layer protein, but which do not as a wild-type possess an S-layer (such as L. casei), and modified bacteria which express only a modified surface layer protein (and not the wild-type S-layer protein). The wild type S-layer is completely replaced with the modified version where the polynucleotide encoding the modified version is integrated into the bacterial genome. The modified S-proteins can form crystalline arrays, sheets or layers that can be used to bind functional molecules (e.g. receptors) to solid surfaces (Au, silicon wafers) in biosensors.
Cette invention porte sur des protéines à couche de surface bactérienne modifiées pour lesquelles la modification réside dans l'introduction, au niveau interne, d'un polypeptide hétérologue ou d'un polypeptide d'intérêt. Le polypeptide est une protéine de liaison ou une protéine cible, telle qu'un antigène ou un anticorps, ou une portion de ceux-ci, en particulier un antigène bactérien (provenant par exemple de Clostridium tetani tel que TTFC). La protéine à couche de surface modifiée peut ensuite être exprimée sur la surface de la cellule bactérienne et utilisée dans un vaccin. Cette invention concerne également des bactéries qui ont été modifiées pour exprimer une protéine à couche de surface hétérologue mais qui, du fait de leur type sauvage, ne possèdent pas de couche de surface (comme le L. Casei) et concerne également des bactéries modifiées qui expriment uniquement une protéine à couche de surface modifiée (et non la protéine à couche de surface de type sauvage). La couche de surface de type sauvage est entièrement remplacée par la version modifiée dans laquelle le polynucléotide codant la version modifiée est introduit dans le génome bactérien. Les protéines à couche de surface modifiées peuvent former des réseaux, feuilles ou couches cristallins pouvant être utilisés pour lier des molécules fonctionnelles (telles que des récepteurs) à des surfaces solides (Au, tranches de silicium) dans des biocapteurs.
Pouwels Pieter Hendrik
Smit Egbert
Tielen Frans
Nederlandse Organisatie Voor Toegepastnatuurwetenschappelijk Ond
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1910621