Modified family 6 glycosidases with altered substrate...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 9/42 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 9/24 (2006.01) C12N 15/56 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12P 19/02 (2006.01)

Patent

CA 2730662

A modified Family 6 glycosidase enzyme comprising amino acid substitutions at one or more positions selected from the group 182, 367, 399, 400 and 427 is provided (the position deter-mined form alignment of a parental Family 6 glycosidase with SEQ ID NO: 1). Genetic constructs and genetically modified microbes comprising nucleic sequences encoding the modified Family 6 gly-cosidase are also provided. Family 6 glycosidase of the invention dis-play decreased hydrolysis activity of beta 1-4 linked polysaccharides and increased hydrolysis activity of beta 1-3, 1-4 linked polysaccha-rides compared with a parental Family 6 glycosidase. Such glycosi-dases find use in a variety of applications in industry, e.g., in hydroly-sis of beta 1-3, 1-4 linked polysaccharides during the processing of cereal grains or the production of alcohol, animal feed or food prod-ucts.

L'invention porte sur une enzyme glycosidase de la famille 6 modifiée qui comporte des substitutions d'acides aminés au niveau d'une ou de plusieurs positions choisies dans le groupe des positions 182, 367, 399, 400 et 427 (la position étant déterminée à partir d'un alignement d'une glycosidase de la famille 6 parente avec SEQ ID NO: 1). L'invention porte également sur des constructions génétiques et sur des microbes génétiquement modifiés qui comportent des séquences nucléiques codant pour la glycosidase de la famille 6 modifiée. La glycosidase de la famille 6 de l'invention présente une activité diminuée d'hydrolyse des bêta-polysaccharides à liaison 1-4 et une activité accrue d'hydrolyse des bêta-polysaccharides à liaison 1-3, 1-4 par comparaison avec une glycosidase de la famille 6 parente. De telles glycosidases trouvent une utilisation dans un grand nombre d'applications dans l'industrie, par exemple, dans l'hydrolyse de bêta-polysaccharides à liaison 1-3, 1-4 au cours de la transformation de grains céréaliers ou de la fabrication d'alcool, de nourriture pour animaux ou de produits alimentaires.

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