Molecular detection systems utilizing reiterative...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H

Patent

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C07H 21/00 (2006.01) C07H 21/02 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01)

Patent

CA 2523442

The present invention provides methods for detecting the presence of a target molecule by the use of nucleotide analogs containing moieties that enable detection. Such analogs may be incorporated into nucleic acids. In one embodiment, nucleotide analogs are used in a process generating multiple detectable oligonucleotides through reiterative enzymatic oligonucleotide synthesis events on a defined polynucleotide sequence. The methods generally comprise using a nucleoside, a mononucleotide, an oligonucleotide, or a polynucleotide, or analog thereof, to initiate synthesis of an oligonucleotide product that is substantially complementary to a target site on the defined polynucleotide sequence; optionally using nucleotides or nucleotide analogs as oligonucleotide chain elongators or chain terminators to terminate the polymerization reaction; and detecting multiple oligonucleotide products that have been synthesized by the polymerase.

L'invention concerne des procédés de détection de la présence d'une molécule cible, au moyen d'analogues de nucléotides renfermant des fragments permettant d'effectuer une telle détection. De tels analogues peuvent être incorporés dans des acides nucléiques. Dans un mode de réalisation, des analogues de nucléotides sont utilisés dans un procédé générant plusieurs oligonucléotides pouvant être détectés par l'intermédiaire d'événements de synthèse réitérative d'oligonucléotides enzymatiques sur une séquence polynucléotidique définie. Les procédés consistent, en général, à utiliser un nucléoside, un mononucléotide, un oligonucléotide ou polynucléotide ou un analogue de ceux-ci, aux fins d'initialisation de la synthèse d'un produit oligonucléotidique sensiblement complémentaire à un site cible sur la séquence polynucléotidique définie; à utiliser éventuellement des nucléotides ou des analogues de nucléotides comme allongeurs de chaînes oligonucléotidiques ou terminateurs de chaînes, de manière à achever la réaction de polymérisation; et à détecter plusieurs produits oligonucléotidiques ayant été synthétisés au moyen de la polymérase.

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