Molecular diagnosis of viral infections

Details Molecular diagnosis of viral infections Molecular diagnosis of viral infections

C - Chemistry, Metallurgy

12

Q

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)

Patent

CA 2231271

Reverse transcription employing pooled short oligonucleotides of random sequence as primers is used to obtain cDNA from viral RNA in a extract of cells suspected of being infected by RNA pathogens. The cDNA may be amplified in a single PCR procedure employing primers specific for two or more pathogens in order to detect the presence of multiple RNA pathogen infection in the cells. DNA so amplified may incorporate bromo-deoxyuridine which facilitates a convenient and non-radioactive means for detecting the amplified product.

On a recours à la transcription inverse faisant appel, en guise d'amorces, à des oligonucléotides courts regroupés de séquence aléatoire pour obtenir de l'ADNc à partir d'ARN viral dans un extrait de cellules que l'on soupçonne d'être infectées par des pathogènes à ARN. L'ADNc peut être amplifié au moyen d'une seule procédure de PCR utilisant des sondes spécifiques à deux pathogènes ou plus afin de déceler la présence d'une infection par de nombreux pathogènes à ARN dans les cellules. L'ADN ainsi amplifié peut comprendre du bromo-déoxyuridine qui est un moyen commode et non radioactif de déceler le produit amplifié.

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