C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/79 (2006.01) C07K 17/00 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01) C12N 15/66 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2462113
A eukaryotic expression vector capable of displaying a multi-chain polypeptide on the surface of a host cell is provided, such that the biological activity the multi-chain polypeptide is exhibited at the surface of the host cell. Such a vector allows for the display of complex biologically active polypeptides, e.g., biologically active multi-chain polypeptides such as immunoglobulin Fab fragments. The present invention describes and enables the successful display of a multi-chain polypeptide on the surface of a eukaryotic host cell. Preferred vectors are described for expressing the chains of a multi-chain polypeptide in a host cell separately and independently (e.g., under separate vector control elements, and/or on separate expression vectors, thus forming a matched vector set). The use of such matched vector sets provides flexibility and versatility in the generation of eukaryotic display libraries, for example the ability to generate and to display multi-chain polypeptides by combining and recombining vectors that express variegations of the individual chains of a multi-chain polypeptide. Entire repertoires of novel chain combinations can be devised using such vector sets.
L'invention concerne un vecteur d'expression eukaryote capable d'afficher un polypeptide multichaîne sur la surface d'une cellule hôte, de sorte que l'activité biologique de ce polypeptide multichaîne est présenté au niveau de la surface de ladite cellule hôte. Ce vecteur permet d'afficher des polypeptides actifs biologiquement complexes, par exemple, des polypeptides multichaîne biologiquement actifs tels que des fragments Fab d'immunoglobuline. L'invention concerne et permet d'afficher avec succès un polypeptide multichaîne sur la surface d'une cellule eukaryote. Des vecteurs préférés décrits permettent d'exprimer les chaînes d'un polypeptide multichaîne dans une cellule hôte séparément et indépendamment (par exemple, sous des éléments de commande de vecteur séparé et/ou sur des vecteurs d'expression séparés, ce qui permet de former un ensemble de vecteurs correspondant ). L'utilisation de ces ensembles de vecteurs correspondant fournit souplesse et polyvalence dans la construction de bibliothèques d'affichage de cellules eukaryotes, par exemple, la capacité de générer et d'afficher des polypeptides multichaîne par combinaison et recombinaison de vecteurs exprimant des variations des chaînes individuelles d'un polypeptide multichaîne. Des répertoires entiers de nouvelles combinaisons de chaînes peuvent être conçus à l'aide de ces ensembles de vecteurs.
Hoogenboom Hendricus R. J. M.
Hufton Simon E.
Dyax Corp.
Smart & Biggar
LandOfFree
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