C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) A61K 39/395 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) C07K 16/18 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01) C07K 16/44 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2222055
The present invention relates to the construction and use of small multimerization devices, preferably of human origin, which self-assemble fused functional domains to multimeric and multifunctional complexes. Multimerization devices of this invention do not significantly interfere with secretion, expression yields and the independent folding of functional domains, which are attached via flexible but protease-resistant linkers. Modular gene cassettes encoding functional domains, linkers and multimerization domain can easily be combined to a cistron encoding the multimeric protein. Translation in a suitable host results in self-assembly to multimers larger than dimers. In cases, in which one or both functional domains are not expressible in sufficient yields or native fold in the same expression host, multimeric proteins can be produced, in which one or both functional domains or the multimerization device are produced separately by, e.g., in vitro translation, peptide synthesis and/or refolding and subsequently, e.g., chemically coupled to the remaining part of the multimeric protein.
La présente invention concerne la construction et l'utilisation de petits dispositifs de multimérisation, de préférence d'origine humaine, qui assurent l'auto-assemblage de domaines fonctionnels fusionnés à des complexes multimériques et multifonctionnels. Les dispositifs de multimérisation de la présente invention n'affectent pas substantiellement la sécrétion, les rendements d'expression ni le repliement indépendant des domaines fonctionnels, qui sont attachés par l'intermédiaire de lieurs flexibles, mais résistants aux protéases. Des cassettes de gènes modulaires codant les domaines fonctionnels, les lieurs et le domaine de multimérisation peuvent facilement être combinées à un cistron codant la protéine multimérique. La traduction dans un hôte approprié entraîne l'auto-assemblage en multimères plus gros que des dimères. Dans les cas où un ou les deux domaines fonctionnels ne peuvent être exprimés avec un rendement suffisant ou un repliement natif dans le même hôte d'expression, on peut produire des protéines multimériques dans lesquelles un ou les deux domaines fonctionnels ou le dispositif de multimérisation sont produits séparément, p. ex., traduction in vitro, synthèse et/ou nouveau repliement peptidique et, ensuite, p. ex., couplage chimique à la partie restante de la protéine multimérique.
Hoess Adolf
Pack Peter
Blake Cassels & Graydon Llp
Morphosys Gesellschaft Fur Proteinoptimierung Mbh
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1425984