Multiplex pcr

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C - Chemistry, Metallurgy

12

Q

C12Q 1/68 (2006.01) C07H 19/00 (2006.01) C07H 21/02 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)

Patent

CA 2467577

Compositions and methods for nucleic acid amplification are provided that minimize the formation and amplification of spurious products, particularly in multiplex amplification reactions. Linear amplification molecules are provided. A first embodiment comprises a first common primer sequence, a first template homology region, a cleavable site, a second common primer sequence and a second template homology region. Methods employing the linear amplification molecules for nucleic acid amplification are also provided. A first embodiment comprises a template-specific hybridization, a linear amplification, a template-specific intramolecular hybridization, a strand cleavage, a second linear amplification and an exponential amplification using common primers.

Compositions et méthodes d'amplification d'acide nucléique qui réduisent à un minimum la formation et l'amplification de produits parasites, en particulier dans des réactions d'amplification multiplex. Des molécules d'amplification linéaires sont disponibles. Le premier mode de réalisation comprend une première séquence amorce commune, une première région d'homologie de matrice, un site pouvant être clivé, une seconde séquence amorce commune et une seconde région d'homologie de matrice. Des méthodes reposant sur l'utilisation des molécules d'amplification linéaires pour l'amplification d'acide nucléique sont également décrites. Le premier mode de réalisation permet d'obtenir une hybridation spécifique de l'amorce, une amplification linéaire, une hybridation intramoléculaire spécifique de l'amorce, un clivage de brin, une seconde amplification linéaire et une amplification exponentielle à l'aide des amorces communes.

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