Mutant plasminogen activator-inhibitor type 1 (pai-1) and...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/15 (2006.01) A61K 38/57 (2006.01) C07K 14/81 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01) C07K 16/38 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2233670

Mutants of the human PAI-1 protein are described which are inhibitors of neutrophil elastase or are inhibitors of vitronectin (Vn)-dependent cell migration. These mutants preferably comprise one or two amino acid substitutions in the reactive center loop of PAI-1, particularly at positions 331 and 346 of the mature protein. These mutants are notable in being resistant to inactivation by elastase, having high affinity for Vn, or both properties. These mutant proteins as pharmaceutical compositions are used to inhibit elastase in a subject, thereby treating a number of disorders associated with elastase activity, most notably emphysema, ARDS, inflammatory lung injury and cystic fibrosis. The mutants which interact with Vn are used to inhibit cell migration in a subject, thereby treating diseases or conditions associated with undesired cell migration and proliferation, particularly of smooth muscle cells. Such conditions include atherosclerosis, post angioplasty restenosis, fibrosis associated with chronic inflammation or chemotherapy, tumor invasion and metastasis and conditions in which angiogenesis is pathogenic. Also disclosed are peptides of such mutant proteins, mutant-specific antibodies, nucleic acid molecules, particularly DNA, encoding the mutant protein and host cells transformed by such nucleic acids.

L'invention concerne des formes mutantes de la protéine humaine IAP-1, qui sont des inhibiteurs de l'élastase des granulocytes neutrophiles ou qui sont des inhibiteurs de la migration cellulaire, conditionnée par la vitronectine. Le mutation est produite, de préférence, par une substitution au niveau d'un ou de deux aminoacides de la boucle réactive centrale de l'IAP-1, en particulier au niveau des aminoacides aux positions 331 et 346 de la protéine mature. Ces protéines mutantes ont la particularité d'êtres résistantes à une inactivation par l'élastase et/ou d'avoir une affinité élevée pour la vitronectine. Ces protéines mutantes sont utiles pour des compositions pharmaceutiques destinées à inhiber l'élastase chez un sujet, ce qui permet de traiter un grand nombre de troubles liés à l'activité de l'élastase, en particulier les emphysèmes (emphysème pulmonaire), les lésions inflammatoires des poumons et la mucoviscidose. Les protéines mutantes qui réagissent avec la vitronectine sont utilisées pour inhiber la migration cellulaire indésirable chez un sujet, ce qui permet de traiter les maladies ou les troubles associés à une migration indésirable de cellules et leur prolifération, en particulier dans le cas de cellules des muscles lisses. Parmi ces troubles, on peut citer l'athérosclérose, les resténoses consécutives à une angioplastie, les fibroses associées à des inflammations chroniques ou provoquées par une chimiothérapie, la formation de tumeurs invasives ou la formation de métastases, ainsi que tous les états où l'angiogénèse prend un caractère pathogène. On décrit, également,des peptides dérivés de ces protéines mutantes, des anticorps spécifiques de ces protéines mutantes, des molécules d'acides nucléiques, en particulier des molécules d'ADN codant pour la protéine mutante et des cellules hôtes transformées par de tels acides nucléiques.

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