Mutant rna polymerases

Details Mutant rna polymerases Mutant rna polymerases

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 9/12 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)

Patent

CA 2450319

It is intended to provide novel mutant RNA polymerases enabling a transcriptional sequencing method whereby a high SN ratio can be achieved in sequence analysis with the use of capillary and longer and more accurate base sequencial data can be obtained by a single reaction. More specifically, a mutant RNA polymerase derived from a wild type RNA polymerase by substitution of at least one amino acid and deletion of at least one amino acid, or a mutant RNA polymerase derived from a wild type RNA polymerase by deletion of at least one amino acid, wherein the above-described substitution and/or deletion of amino acid(s) have been performed so that the resultant mutant RNA polymerase has an enhanced ability to incorporate 3~-deoxynucleotide as a substrate compared with the wild type RNA polymerase corresponding thereto.

L'invention concerne de nouvelles ARN polymérases mutantes permettant un procédé de séquençage transcriptionnel selon lequel un taux de SN élevé peut être obtenu dans l'analyse de séquence à l'aide de capillaires, et selon lequel des données séquentielles de base plus longues et plus précises peuvent être obtenues à l'aide d'une seule réaction. Plus spécifiquement, l'invention concerne une ARN polymérase mutante dérivée d'une ARN polymérase de type sauvage par substitution d'au moins un amino-acide et par élimination d'au moins un amino-acide, ou une ARN polymérase mutante dérivée d'une ARN polymérase de type sauvage par élimination d'au moins un amino-acide. Les substitution et/ou élimination susmentionnées d'un ou plusieurs amino-acides ont été effectuées de façon que l'ARN polymérase mutante résultante possède une capacité accrue d'incorporer 3'-déoxynucléotide en tant que substance de base, en comparaison de l'ARN polymérase de type sauvage correspondant à celui-ci.

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