C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/435 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)
Patent
CA 2445035
The present invention provides novel engineered derivatives of green fluorescent protein (GFP) which have an amino acid sequence which is modified by amino acid substitution compared with the amino acid sequence of wild type Green Fluorescent Protein. The modified GFPs exhibit enhanced fluorescence relative to wtGFP when expressed in non-homologous cells at temperatures above 30 ~C, and when excited at about 490 nm compared to the parent proteins, i.e. wtGFP. An example of a preferred protein is F64L-S175G-E222G-GFP. The modified GFPs provide a means for detecting GFP reporters in mammalian cells at lower levels of expression and/or increased sensitivity relative to wtGFP. This greatly improves the usefulness of fluorescent proteins in studying cellular functions in living cells.
La présente invention concerne de nouveaux dérivés modifiés de la protéine fluorescente verte (GFP) qui présentent une séquence d'acides aminés modifiée par substitution d'acides aminés par rapport à la séquence d'acides aminés de la protéine fluorescente verte de type sauvage (wtGFP). Les GFP modifiées présentent une fluorescence accrue par rapport à la wtGFP lorsqu'elles sont exprimées dans des cellules non homologues à des températures supérieures à 30 ·C et lorsqu'elles sont excitées à près de 490 nm, comparé aux protéines mères, c'est-à-dire la wtGFP. F64L-S175G-E222G-GFP est un exemple de protéine préférée. Les GFP modifiées constituent un moyen pour détecter des reporters GFP dans des cellules mammifères à des niveaux d'expression inférieurs et/ou une sensibilité accrue par rapport à la wtGFP. L'utilité des protéines fluorescentes dans l'étude de fonctions cellulaires dans des cellules vivantes s'en trouve considérablement accrue.
Jones Anne Elizabeth
Michael Nigel Paul
Stubbs Simon Lawrence John
Thomas Nicholas
Amersham Biosciences Uk Limited
Fetherstonhaugh & Co.
Ge Healthcare Uk Limited
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1735824