C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/31 (2006.01) A61K 39/02 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C07K 14/30 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) G01N 33/564 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)
Patent
CA 2249449
The gene encoding the superantigen Mycoplasma arthritidis T-cell mitogen (MAM) was molecularly cloned. The mam gene was modified by site-directed mutagenesis to change UGA codons, which in mycoplasmas are read as tryptophan codons instead of universal stop codons, to UGG codons such that the gene could be expressed in standard expression systems. Recombinant MAM, including extra amino acid residues at the - and C-termini, were expressed and discovered to be biologically active. Certain amino acid substitutions in active regions of the protein also yield biologically active MAM proteins. A method of diagnosing rheumatoid arthritis using recombinant MAM protein in an ELISA assay is disclosed.
On a effectué le clonage moléculaire du gène codant le mitogène superantigène des lymphocytes T de Mycoplasma arthritidis (MAM). On a modifié le gène mam par mutagenèse localisée, de manière à transformer en codons d'UGG les codons d'UGA, lus dans des mycoplasmes en tant que codons de tryptophane au lieu de codons polyvalents d'arrêt, de façon à permettre l'expression du gène dans des systèmes d'expression standard. On a exprimé MAM de recombinaison, y compris d'autres résidus au niveau des terminaisons - et C- et découvert son activité biologique. Certaines substitutions d'acides aminés dans des régions actives de la protéine produisent également des protéines de MAM biologiquement actives. L'invention concerne un procédé de diagnostic de la polyarthrite rhumatoïde au moyen de la protéine de recombinaison de MAM dans une méthode de détection ELISA.
Atkin Curtis L.
Cole Barry C.
Knudtson Kevin L.
Sawitzke Allen D.
Smart & Biggar
University Of Utah Research Foundation
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2007815