Nano-pcr: methods and devices for nucleic acid amplification...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)

Patent

CA 2566538

Methods, devices, and compositions are described that provide for amplification of nucleic acid sequences without reliance upon temperature cycling, thus freeing the methods from conventional benchtop thermal cycling devices. Denaturation of double stranded nucleic acids, primer annealing, and precision control over primer extension by polymerase can be accomplished by applying stress to a nucleic acid. These methods can provide one ore more benefits over conventional PCR methods including: precision control over the PCR process; generally improved fidelity; improved accuracy over problematic sequences such as GC-rich or tandem repeat regions; greater sequence length; increased reaction yield; reduced experimental time; greater efficiency; lower cost; greater portability; and, robustness to various environmental parameters, such as temperature, pH, and ionic strengths.

La présente invention a trait à des procédés, des dispositifs, et des compositions permettant l'amplification de séquences d'acides nucléiques indépendamment de cycle de température, permettant ainsi l'élimination de dispositifs de cycle thermique de tables de laboratoire classiques. La dénaturation d'acides nucléiques double brin, le recuit d'amorces, et le contrôle de précision sur l'extension d'amorces par la polymérase peuvent être réalisés par l'application de contrainte à un acide nucléique. Ces procédés peuvent procurer un ou des avantages sur des procédés d'amplification par la polymérase classiques comprenant: le contrôle de précision sur le procédé d'amplification par la polymérase; une fidélité globalement améliorée; une précision améliorée sur des séquences problématiques telles que des régions riches en GG ou de séquences répétées en tandem; une performance de réaction accrue; un temps expérimental réduit; une meilleure efficacité; un coût réduit; une plus grande portabilité; et une robustesse à divers paramètres environnementaux, tels que la température, le pH, et les forces ioniques.

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